本周 Diasorin 索靈18億美金收購Luminex的確引起蠻大轟動和反響,luminex自身老牌企業科研和診斷通吃,免疫和分子通吃。四大技術加持,今天我們先看看MultiCode?,如何實現獨家ZL的多重PCR檢測!
Luminex的 MultiCode? 產品為基于實時PCR和多重 PCR 的檢測提供了一個靈活的平臺。MultiCode 產品基于獨特的ZL的MultiCode 堿基 isoC 和 isoG。合成的 isoC:isoG DNA 堿基對的氫鍵結合方式有別于天然存在的堿基對。其結果是,MultiCode 堿基 isoC 和 isoG 只能彼此相互進行堿基配對。此特性使得 iso 堿基在擴增過程中可進行位點特異性結合。
IsoC 和 isoG 堿基是Luminex 下一代基于核酸的MultiCode 檢測試劑的基石。基于MultiCode 的PCR 檢測試劑可高特異性的用于傳染性疾病和基于遺傳基因的早期檢測。
第一步:引物擴增,一條正常引物,一條帶有isoC和reporter基團;
第二步:DNA聚合酶進行擴增,擴增子代鏈中帶有isoC+報告基團。
第三步:擴增,淬滅過程的實現。
整個反應體系中,除了常規dNTP外,還需要加入帶有淬滅基團的isoG。在聚合酶進行擴增過程中,一旦遇到帶有isoC的擴增模板鏈,就會使用且僅會使用淬滅基團的isoG。此處原理就類似分子信標或Taqman探針,報告基團和淬滅基團靠近,熒光消失。當進行升溫時,發生解鏈,熒光信號重新恢復。
準確地講,這一步在靶序列進行第二輪擴增時就會發生。
第四步:結果分析,所以不難理解Luminex的 MultiCode? 的擴增曲線和溶解曲線均為倒置的。
看起來,是不是有點出乎意料。如果要進行多重PCR,選擇不同的熒光染料就可以實現了。