M13噬菌體是一種絲狀噬菌體,感染宿主后不裂解細菌細胞,只利用細胞內物質完成自身增殖,組裝成完整病毒顆粒后被宿主細胞分泌而出,宿主細胞仍能繼續生長分裂。為分子生物學中理想的質粒載體。基因間隔區的有些核苷酸序列即使發生突變、缺失活插入外源DNA片段,也不會影響M13DNA的復制,這為M13DNA構建克隆載體提供了條件。
| 實驗材料 | |
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| 試劑、試劑盒 | |
| 儀器、耗材 | |
| 實驗步驟 | 1. 將來自一個單菌落的過夜培蕎新鮮菌液按1 :50稀釋,在含有適當抗生素的2xYT培養液(1~5 ml)中,于37℃培養至OD600=0.1。
3. 4 000 g 離心10 min,收集上請液并于65℃加熱滅活15 min。
4. 從上清液中提取單鏈DNA,在瓊脂糖凝膠上分析單鏈DNA,并用輔助噬菌體作為對照。 |