M13噬菌體衣殼蛋白改造在改良噬菌體展示技

羧芐青霉素 氯霉素 大腸桿菌 CJ236

生理磷酸緩沖液 超純甘油 PBS-T 緩沖液 PBS-T-BSA 緩沖液

2YT 培養基 SOC 培養基

下述方法描述了 P8 庫的設計（見 12.3.1)、構建（見 12.3.2 )、選擇（見 12.3.3.1 ) 和篩選（見 12.3.3.2)，依此來鑒定能改進蛋白質表達水平的突變體。我們描述了利用前述噬菌粒—— pS1607 改進 hGH 表達水平的方案。這一方法也適用于任何其他靶蛋白。唯一的改變就是用表達靶蛋白的噬菌體粒取代 pS1607 以及用高親和性
的靶蛋白配體取代 hGH 結合蛋白。

3.1 庫的設計

我們前面已經提及在噬菌粒表達系統中 P8 的 N 端部分極度耐受突變，其中有些突變能增加異源融合蛋白的展示水平 [ 10，11 ]。隨后，我們發現 P8 的 N 端只有 6 個野生型殘基側鏈（Ala 7、Ala 9、Ala 10、Phe11、Leu14 和 Ala18 ) 對