試劑和材料：
1.完全培養基（CCM）：α-MEM：α-低限量基礎培養基，含谷氨酰胺，無核苷酸或脫氧核苷酸；添加：20%附加L-谷氨酰胺 2mmol/L、經F雜交瘤純化，非熱滅活、青霉素100U/ml、鏈霉素100μg/ml。過濾除菌。儲存于4℃，不超過2周；
2.FDM（脂肪分化培養基）：①FDM：CCM包含0.5μmol/L
IBMX，50μmol/mlIM和0.5μmol/L地塞米松。②異丁基甲基黃嘌呤（IBMX），1000&time儲存液，用甲醇配制成0.5mmol/L。③吲哚美辛（IM）：1000&time儲存液，用甲醇配制成50mmol/L。④地塞米松：1000&time儲存液，用水配制成0.5mmol/L；
3.A；
4.胰蛋白酶/EDTA；
5.聚丙烯離心管，15ml和50ml；
6.組織培養皿，6孔，孔面積為9.6cm2；
7.0.85%臺盼藍鹽溶液；
8.中性福爾馬林緩沖液，10%；
9.ORO工作液：ORO用異丙醇配制成1%，3份。A，2份。70μm細胞濾網過濾；
10.改良的Neubauer血細胞計數器；
實驗方法：
1.從單層細胞中收集MSCs；
2.向6孔培養板的每個孔中加入2ml CCM，共有1&time105個細胞（適用于人或大鼠）。最終密度約1&time103個細胞/cm2；
3.將上排3個孔標記為“成脂”，下排3個孔標記為“陰性”；
4.在37℃，5%CO2環境下孵育，每隔兩天更換一次培養基，直到細胞達到7.%—80%匯合；
5.達到所需的細胞密度時，從孔中吸出完全樣機，向6孔培養板上排的孔中加入2ml FDM，向下排
的孔中加入2ml CCM；
6.在37℃，5%CO2環境下孵育，每隔兩天更換一次培養基。ORO檢測時，于21天對細胞進行染色；
（1）從培養箱中取出分化后的MSCs，每孔中的單層細胞用2ml A潤洗兩次；
（2）每孔中加入2ml福爾馬林，室溫固定單層細胞10min；
（3）吸出福爾馬林，每孔中加入2ml A潤洗兩次后，再用2ml蒸餾水潤洗一次；
（4）加入2ml ORO工作液，室溫孵育30min；
（5）過量A潤洗各孔，直到“陰性”孔中的背景染色最大限度地清除；
7.用顯微鏡觀察標記為“成脂”的單層細胞評價脂滴的染色程度。成脂分化達到令人滿意的水平時，單層細胞ORO著色面積超過30%。此時，單層細胞可在4℃ A中最多存放7天。或者，將ORO從著色的單層細胞中提取出來，用先前描述的方案進行測定。