實驗方法原理
實驗材料 MSCs
試劑、試劑盒 無菌完全培養培養基（CCM）、PBSA、胰蛋白酶 EDTA
儀器、耗材 聚丙烯離心管15 mL和50 mL、塑料組織培養皿直徑15 cm、塑料微量移液器槍頭
實驗步驟
(a)檢査所得的MSCs。如果培養物中小的、貼壁、紡錘形的成纖維細胞樣細胞匯合至60%時，對其進行處理。如果單層細胞稀疏,繼續潤洗和更換培養基。
(b)按如下步驟消化單層細胞：用20 mL預熱的PBSA潤洗單層細胞后，加人5mL胰蛋白酶/EDTA。將培養皿置于37℃ 2min，在1O×放大倍數視野下觀察單層細胞。貼壁細胞應正從塑料培養瓶上脫落。將培養皿置于37℃ 2min,再次觀察。重復觀察直到90%的MSCs已從培養瓶中脫落下來。加人5mL CCM,將10mL懸液移至15 mL離心管中，500g離心10 min。離心完畢，棄去上清，每管用1?2mL預熱的PBSA重懸沉淀。如有必要，混合多管細胞懸液只進行一次細胞計數。