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  • 發布時間:2020-05-12 19:35 原文鏈接: MTT法與CCK8法綜合優勢比較

    CCK-8細胞活性檢測試劑中含有WST-8,化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽],它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物(Formazan)。生成的甲瓚物的數量與活細胞的數量成正比。用酶聯免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。

    MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。

    CCK-8法的優點:

    1、使用方便,省去了洗滌細胞,不需要放射性同位素和有機溶劑;

    2、CCK-8法能快速檢測;

    3、CCK-8法的檢測靈敏度很高,甚至可以測定較低細胞密度;

    4、CCK-8法的重復性優于MTT法;

    5、CCK-8法對細胞毒性小;

    6、CCK-8細胞活性檢測試劑中為1瓶溶液,毋需預制,即開即用。

    CCK-8法的缺點:

    1、與MTT法相比,CCK-8和XTT的價格比較貴。

    2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養基顏色接近,不注意的話容易產生漏加或多加。

    CCK-8法和MTT法的區別


    CCK-8法或稱WST-8法

    MTT法

    1

    還原后的Formazan是水溶性的 
    (不需要溶解)

    還原后的Formazan是非水溶性的 
    (需要加有機溶劑溶解)

    2

    重現性好

    由于在去上清操作時會有可能帶走小部分的Formazan,故有時重復性略差

    3

    操作簡便

    操作繁瑣

    4

    測定波長:450~490nm

    測定波長:550~600nm

    5

    為1瓶溶液,無需預制,即開即用

    由于需要加有機溶劑溶解,工作量比較大

     

    如何選擇合適的CCK-8檢測試劑盒

    目前市面上能提供的【CCK-8】細胞增殖/毒性檢測試劑盒有國產分裝或原產的,國產分裝的CCK-8試劑盒在質量穩定性上有不足。而原產于國內實驗室的CCK-8試劑盒有些具有較好的檢測結果,在批次之間的穩定性上較難控制。至于原裝進口供應CCK-8試劑盒的進口品牌并不多,就連Abcam、Thermo,Sigma等等幾個品牌都不能夠提供CCK-8試劑盒,而其它品牌在性價比上遠遜于Abbkine產品。

    作為Abbkine品牌旗下首款細胞分析旗艦產品,Cell Counting Kit (CCK-8),Abbkine研發工程師為其傾注了大量的投入,不斷摸索優化最佳的配方,每一份努力只為讓科研工作者更加簡單,高效,穩定地獲取珍貴的科研數據。

    本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無須再進行任何配制等操作 。無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan。可以用于大批量樣品的檢測。


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