MTT法也就是MTT比色法，這種方法就是用來檢測檢測細胞存活和生長的。
這個方法中的MTT濃度為5mg/ml，可以稱取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸緩沖液（PBS）或無酚紅的培養基中，用0.22μm濾膜過濾以除去溶液里的細菌，放4℃ 避光保存即可。您在配制和保存的過程中，容器用鋁箔紙包住。
實驗步驟：
1、取96孔細胞培養板，每孔中加0.1ml含2×104 ～10×104 靶細胞的培養液（含10％小牛血清的RPMI-1640培養液），在37℃ 5％CO2 的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養2～3小時讓細胞帖壁。
2、用RPMI-1640培養液2～10倍遞次稀釋細胞因子標準品，根據情況2～5倍遞次稀釋待檢樣品，每孔加0.1ml稀釋的標準品和待檢樣品，每個稀釋度3個重復孔。對照孔6個：3個陽性對照孔，每孔加0.1ml含大劑量細胞因子的RPMI-1640培養液，3個陰性對照孔，每孔加0.1ml RPMI-1640培養液。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養24～48小時或預定的時間。
3、吸去培養液，用PBS洗滌一次。
4、每孔加0.1ml PBS和10μl MTT染液，在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養4～6小時。
5、每孔加0.1ml酸化異丙醇，也可用含10％ SDS的10mmol/L HCl代替酸化異丙醇，在振蕩器上振蕩混勻，讓還原產物充分溶解。置酶聯檢測儀上測定光密度（OD）值，檢測波長570nm，參考波長630nm。以OD值對樣品稀釋度作圖，比較標準曲線和待測樣品曲線即可求得待測樣品中細胞因子的含量。
以上就是我們今天為您整理的檢測細胞生長實驗步驟，在實驗的過程中朋友們也要注意一些細節部分。在個步驟的時候懸浮細胞的話可以直接進行下一步。