疫苗根據工藝分為減毒疫苗,滅活疫苗,亞單位疫苗,基因工程疫苗,涉及一系方法進行質量控制,其中等電點及電荷變異體對于鑒別和工藝穩定性至關重要。本文涉及病毒,重組疫苗,mRNA疫苗,病毒樣顆粒(VLP)等不同類別疫苗的等電點及電荷異質性檢測。
1.新型人乳頭瘤病毒(HPV)治療性疫苗等電點測定

上海澤潤生物技術有限公司質量研究部,利用iCIEF,對新型人乳頭瘤病毒(HPV)治療性疫苗HPV16E7-HBcAg-Hsp65融合蛋白的等電點,進行圖譜鑒定。
Characterization and evaluation of the
immune responses elicited by a novel human papIllomavirus (HPV)
therapeutic vaccine: HPV16E7-HBcAg-Hsp65 fusion protein, J Virol Methods, 197, 1-6 Mar 2014.
2.活體脊髓灰質炎病毒等電點檢測

荷蘭轉化疫苗研究所利用iCIEF,觀察不同批次,以及不同儲存形式的1型PV(polio vaccine) Mahoney菌株培養的活體脊髓灰質炎病毒等電點的分析。從而判斷不同批次間病毒的pI測定的可重復性以及凍存對病毒pI值的影響。結果顯示,利用iCIEF觀察到,不同批次A-D之間的pI峰型是可比較的。且新鮮樣品A與存儲在-80°C的批次B-D,在對病毒pI峰型上沒有影響。

利用iCIEF,觀察不同菌株培養的脊髓灰質炎病毒pI峰型圖。為后續工藝開發,建立不同脊髓灰質炎病毒種類的pI表征圖。
Isoelectric point determination of live polioviruses by capIllary isoelectric focusing with whole column imaging detection,Anal Chem, 85 (12), 6089-94 2013 Jun 18.
3. 諾如病毒病毒樣顆粒等電點分析

加拿大圭爾夫大學食品安全研究所利用iCIEF,觀察6個不同種類的諾如病毒病毒樣顆粒(norovirus virus-like particles, VLPs)的pI峰型圖。可以觀察到每個VLP都有一個主峰(用于確定pI)和幾個小峰。后續研究發現,不同顆粒大小的VLP可以呈現不同的pI值。由于顆粒的不穩定,可以降解形成不同分子量的切割產物,因此構成峰形圖中的小峰。

利用iCIEF觀察諾如病毒病毒樣顆粒的pI峰重現性。結果顯示,利用iCIEF檢測到諾如病毒病毒樣顆粒的pI峰重現性很好。
Isoelectric Point Determination of Norovirus Virus-Like Particles by
CapIllary Isoelectric Focusing With Whole Column Imaging Detection, Anal Chem, 76 (1), 48-52 2004 Jan 1.
4. 脂質納米顆粒疫苗表面電荷表征

脂質納米顆粒(LNP)除了用于小分子,siRNA,mRNA和pDNA的藥物遞送,還被用于治療和疫苗的研發。