又稱堿性磷酸酶染色，在臨床的應用基本屬于常規篩查的染色法。
（1）原理（偶氮偶聯法）：血細胞內的堿性磷酸酶在pH 9.4～9.6的條件下將基質液中的α-磷酸萘酚鈉水解，產生α-萘酚與重氮鹽偶聯形成不溶性灰黑色沉淀，定位于酶活性所在之處。
（2）結果判斷：陽性結果為胞質內出現灰褐色至深黑色顆粒狀或片狀沉淀 ①（一）灰褐色沉淀，為0分。②（+）胞質出現灰褐色沉淀，為1分。③（++）胞質深褐色沉淀，為2分。④（+++）胞質中已基本充滿棕黑色顆粒狀沉淀，但密度較低，為3分。⑤（++++）胞質全被深黑色團塊沉淀所充滿，密度高，甚至遮蓋胞核，為4分。
（3）參考值：成熟中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）的積分值為7～51。由于各實驗室的實驗條件不同，正常值也有差異，應建立本實驗室的正常值。這里的正常值僅供參考。
（4）臨床意義
1）生理變化：①年齡變化：新生兒NAP活性增高，以后下降。兒童期各年齡大致相似，成年期較兒童期活性減低，老年期更低。②應激狀態下的變化：緊張、恐懼、激烈運動等NAP活性可增高。③月經周期中的變化：經前期增高，行經后降低，經后期恢復。④妊娠期的變化：妊娠2～3個月的NAP積分值輕度增高，以后逐月增高，分娩時達高峰，產后則恢復正常。
2）病理性變化：①感染：細菌性感染時NAP積分值增高。醫學敎^育^網收集整理在細菌性感染中球菌性感染較桿菌性感染為高；在球菌性感染中，急性較慢性為高。病毒性感染時，NAP積分值一般無明顯變化。因此本染色法有時可幫助鑒別細菌性感染和病毒性感染；②血液病：慢性粒細胞白血病的NAP積分值明顯減低，常為“0”，緩解時NAP積分值上升到正常。類白血病反應時的NAP積分值明顯增高，中性桿狀核粒細胞的堿性磷酸酶活性增強，甚至中性晚幼粒細胞也呈陽性反應。因此本法常用來鑒別慢粒和類白血病反應及觀察慢粒療效的指標之一；急性粒細胞白血病時NAP積分值減低，急性淋巴細胞白血病時NAP積分值一般增高，因此本法可作為鑒別急粒和急淋的方法之一；急性單核細胞白血病時NAP積分值一般減低，有時可正常；粒細胞白血病合并細菌性感染時NAP積分值可增高，但不如單純細菌性感染增高的明顯；再生障礙性貧血的NAP積分值增高，當病情好轉時，NAP積分值可下降，完全緩解時NAP活性可恢復到正常，因此本法對再障的診斷、療效觀察和估計病情均有一定意義；陣發性睡眠性血紅蛋白尿的NAP積分值減低，因此本法可作為鑒別陣發性睡眠性血紅蛋白尿和再生障礙性貧血的方法之一；真性紅細胞增多癥的NAP積分值升高，醫學敎^育^網收集整理而繼發性紅細胞增多癥的NAP積分值無明顯變化。因此本法可用來鑒別真性紅細胞增多癥和繼發性紅細胞增多癥；骨髓增生異常綜合征的NAP積分值減低；③其他
3）其他應用腎上腺皮質激素、雌激素和ACTH后NAP積分值增高。