利用免疫檢查點抑制劑來增強 NK 細胞的殺傷能力并應用于治療也是目前研究的方向之一。某些激活的NK細胞表達PD-1，且 PD-1 信號介導抑制 NK 細胞發揮細胞毒作用。實驗證實PD-1單抗（CT-011）增強 NK 細胞對多發性骨髓瘤患者自體骨髓瘤細胞的殺傷能力[6]；NK細胞與MHC-I類分子與作用抑制NK細胞介導的細胞毒性，抑制性KIR已成為NK細胞免疫檢查點抑制劑的首選靶標。NK細胞表面KIR類的抑制性受體（KIR2DL1, KIR2DL2 和KIR2DL3）可與MHC-I類分子結合，抑制NK細胞活化，IPH2101 是一種人源化抗KIR單克隆抗體，體外實驗結果證實，IPH2101 通過阻斷人源 NK 細胞表面 KIR，可顯著增強 NK 細胞抗腫瘤能力。
圖4. 抗體封閉NK細胞抑制性受體，激活NK細胞
2、嵌合抗原受體（CAR）技術與NK細胞結合
嵌合抗原受體改造的NK細胞，能顯著提高NK細胞療效特異性，其原理亦是在我們先進的NK細胞擴增技術得到的大量NK細胞基礎上，通過基因工程修飾，在NK細胞表面表達能夠和腫瘤特定抗原結合的嵌合抗原受體(CAR)，回輸后能夠特異性識別帶有特定抗原的腫瘤細胞，引發免疫反應從而達到清除腫瘤細胞的目的。有研究顯示CAR-NK 展示出較ADCC更強的細胞毒作用[7]。
CAR-NK細胞治療的優勢[8-9]：
1）異體NK細胞不會引起移植物抗宿主反應（GVHD）；
2）NK細胞治療不分泌炎癥因子致使細胞因子釋放綜合癥發生，如IL-1、IL-6；
3）NK細胞通過自身抗腫瘤的特性，識別并殺傷CAR靶標下調或缺失的腫瘤細胞，提高免疫治療效果；
4）異體NK細胞的來源廣泛：包括外周血，臍帶血，NK 細胞株 (NK-92) 與誘導多能干細胞 (iPSC-NK) 等。
圖5. CAR-engineered NK cell
德克薩斯大學M.D.安德森癌癥中心等研究人員在NEJM雜志公布了美國首個CAR-NK細胞臨床試驗的結果。研究者從捐贈的臍帶血中分離出NK細胞，經過逆轉錄病毒載體轉導相關基因使NK細胞表達理想的嵌合抗原受體(CAR)，用以識別癌癥特異性抗原CD19。臨床結果顯示CAR-NK療法治療復發或難治性非霍奇金淋巴瘤(NHL)和慢性淋巴細胞白血病(CLL)患者，大多數產生了臨床緩解，且未出現主要的毒性作用。
圖6 CAR-NK 治療和緩解后治療的臨床應答
3、雙特異性分子聯結NK細胞活化受體和腫瘤細胞
NK細胞表面存在自然細胞毒性引發受體（NCRs）、C型凝集素（NKG2D）SLAM家族受體、FcγRIII（CD16）等一系列激活型受體，這些激活型受體結合配體后，能引發細胞因子比如IFN-γ、TNF-α的分泌。
CD16可與腫瘤抗原特異性抗體Fc段結合，介導NK細胞識別并殺傷被抗體包被的腫瘤細胞，即ADCC作用[10]，ADCC是NK細胞殺傷靶細胞的主要方式。以NK細胞表面活化受體CD16和NKG2D為靶點的雙特異性分子，可以靶向NK細胞識別并殺傷腫瘤細胞。
Sanofi與法國Innate Pharma達成價值4億歐元合作，共同開發靶向Nkp46的雙特異性抗體，激活NK細胞殺傷腫瘤。Affimed開發雙特異性抗體AFM13，CD30×CD16a組合募集和激活NK細胞，并與Genentech達成戰略合作協議。
圖7. 雙特異分子聯結NK活化受體和腫瘤細胞
小結與展望
NK 細胞已不再僅僅局限于固有免疫范疇，而是在免疫調控網絡中扮演著非常重要的角色，隨著對NK細胞的分子特征和功能的進一步探索，開發以NK細胞為基礎的靶向免疫治療將成為腫瘤免疫治療的新突破。
參考資料
[1]生時昀，馮輝. NK 細胞及其在靶向治療中的應用[J],細胞與分子免疫學雜志（Chin J Cell Mol Immunol），2017，33（5）.
[2]Morvan, Maelig G., and Lewis L. Lanier. "NK cells and cancer: you can teach innate cells new tricks[J]." Nature Reviews Cancer 16.1 (2016): 7.
[3]Carlsten, M., & J?r?s, M. (2019). Natural Killer Cells in Myeloid Malignancies: Immune Surveillance, NK Cell Dysfunction, and Pharmacological Opportunities to Bolster the Endogenous NK Cells. Frontiers in Immunology, 10. [4]Weil, Sandra.Investigation of a NKG2D-dependent tumor immune escape mechanism of head and neck squamous cell carcinoma and proof of concept of a clinical intervention strategy，2017
[5]Joy Hsu,David H. Raulet, Michele Ardolino，et al．Contribution of NK Cells to Immunotherapy Mediated by PD-1/PD-L1 Blockade[J]. J Clin Invest. 2018 Oct 1;128(10):4654-4668. .
[6]Benson D M Jr，Bakan C E，Mishra A，et al． The PD-1 /PD-L1 axis modulates the natural killer cell versus multiple myeloma effect: a therapeutic target for CT-011，a novel monoclonal anti-PD-1 antibody[J].Blood，2010，116(13) : 2286-2294
[7]Hu, Yuan，Tian, Zhi-gang，Zhang, Cai. Chimeric antigen receptor (CAR)-transduced natural killer cells in tumor immunotherapy[J]. Acta Pharmacologica Sinica (2018) 39: 167–176
[8]Wang w，Jiang J，Wu C.CAR-NK for tumor immunotherapy: Clinical transformation and future prospects[J].Cancer Letters，2020,472:175-180
[9]李欣陽. CAR-NK細胞在腫瘤免疫治療方面中的研究進展[J]. 生物化工，2019,5（3）：134-136
[10]Gao H，Liu L，Zhao Y，et al． Human IL-6，IL-17，IL-1β，and TNF-α differently regulate the expression of pro-inflammatory related genes，tissue factor，and swine leukocyte antigen class Ⅰ in porcine aortic endothelial cells[J]. Xenotransplantation，2017 Mar 17．