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  • 發布時間:2020-01-31 21:55 原文鏈接: NRAMP1elisa檢測試劑盒免疫檢測方法

    NRAMP-1 elisa檢測試劑盒免疫檢測方法:

    (一)夾心法:

    可分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法。

    雙抗體夾心法將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體;加入待測樣本,形成固相抗體-抗原復合物,洗滌后加入標記特異性抗體并孵育,形成固相抗體-抗原-標記抗體復合物,洗滌除去未結合的標記抗體;加入不同的反應物質(如酶促底物、堿性溶液、氧化劑等),得到反應信號。

    雙抗原夾心法與雙抗體夾心法類似,將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗原;加入待測樣本,孵育使樣本中的抗原與固相抗體充分反應,形成固相抗原-抗體復合物,洗滌除去未結合物質;加入標記特異性抗原并孵育,加入反應物質,判讀結果。

    (二)間接法:

    間接法僅能檢測抗體,基本原理是將特異性抗原包被在固相載體上,加入待測樣本,形成固相抗原-受測抗體復合物;孵育洗滌后,加入標記抗體。

    (三)競爭法:

    既檢測抗體,也可檢測抗原。

    基本原理是先將抗小分子抗原的特異性抗體包被在固相載體上,然后同時加入待測樣本與標記小分子,待測樣本中的小分子與標記小分子競爭與固相抗體相結合,溫浴一定時間后洗滌加入不同的反應物質,得到反應信號。

    (四)捕獲法:

    NRAMP-1 elisa檢測試劑盒可測定血清中某種特定的免疫球蛋白,目前主要用于IgM抗體的檢測。通常包被的固相抗體為針對IgM分子μ鏈的抗體,加入待測樣本后,特異及非特異的IgM抗體都會被固相抗體捕獲,之后加入能夠與特異性抗體結合的已知抗原,再加入能夠與已知抗原相結合的標記抗體。


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