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  • 在這期中我們一起來領略一下Exploris 480的強悍性能,以及新的軟件特性如何將蛋白質組學推向一個新的高度。

    1.Orbitrap Exploris? 480的鑒定性能

     

     

    Exploris 480是在Q Exactive HF-X的基礎上改進而來,因此其絕對性能指標也是達到了新的高度。其最高掃描速度為40Hz,與Q Exactive HF-X一致。相比Q Exactive HF-X,Exploris 480有著更高的分辨率和靈敏度,更寬的質量范圍和更為豐富的定量模式和選裝模塊。

    性能指標

    質量范圍

    40-6000m/z(可選8000m/z)

    四極桿分離

    低至 0.4u

    掃描速度

    高至 40Hz

    最大分辨率

    480k(m/z 200時)

    動態范圍

    >5000:1

    質量準確度

    3 ppm RMS ext,

    1 ppm RMS int.

    碎裂方式

    高能量碰撞解離(HCD) 

    分析器

    四極桿,Orbitrap

    體積緊湊

    530 x 760 x 700 mm (w,d,h) 

    可選項

    Easy-IC, BioPharma, FAIMS Pro

    性能:強悍的性能指標帶來的是不斷突破記錄的鑒定能力

    上樣500ng – 1μg Hela全細胞酶解產物,單針60分鐘的梯度可實現超過5,000個蛋白的鑒定(圖1)。

     

    圖1. 60分鐘梯度Exploris 480的蛋白鑒定數量

    非標定量

    在Hela細胞樣品中摻入酵母樣品來考察非標記定量的準確性亦得到了非常優良的結果,由于動態范圍和譜圖質量的提升,在非標記定量的實驗中“Match Between Runs”組件的效果得到了更加明顯的體現(圖2)。

     

     

    圖2. Orbitrap Exploris? 480進行非標記定量的性能評估

    2.兼容全新一代FAIMS Pro,進一步提升定性定量能力

    在2018年9月份的HUPO上,賽默飛推出了全新一代的FAIMS Pro (High-Field Asymmetric Waveform Ion Mobility Spectrometry, 高場非對稱波形離子遷移譜),該接口可搭載于TNG系列的質譜儀,例如Orbitrap Fusion, Orbitrap Fusion Lumos質譜儀。搭載該接口可顯著提升質譜的定性定量能力,一經面世即受到市場的熱捧。

    Orbitrap Exploris? 480也采用了TNG式樣的離子源,因此可以選配FAIMS Pro來進一步提升儀器能力。FAIMS Pro是一種大氣壓條件下的離子遷移譜,對于肽段樣品來說主要通過肽段帶電性質的不同來進行分離,從而作為一種在線的氣態樣品分級手段來提高復雜樣品的定性和定量效率(具體內容請見相關閱讀)[1, 2]。將FAIMS Pro作為在線分級手段分別用-40CV/-55CV/-65CV進行60分鐘采集的話可輕松實現54,000+個unique peptide, 對應6,300+個蛋白的鑒定。

     


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