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  • 發布時間:2019-03-02 15:10 原文鏈接: PCR反應實驗操作注意事項

    SSR分子標記實驗:   PCR反應實驗操作注意事項:

    PCR 反應過程中應特別注意不要使樣品相互污染, 以免造成試驗結果不準確, 同時也要注意所加試劑或樣品必須是經過混勻后的液體, 這樣才能保證反應液各成分的濃度和體積的均一性 所用試劑需從正規商家購進, 以保證試劑的質量。

    BEAS-2B細胞 人正常肺上皮細胞
    Bcap-37細胞 人乳腺癌細胞
    B95-8細胞 絨猴EBV轉化的白細胞
    B16-F10細胞 小鼠皮膚黑色素瘤細胞
    ( 1) 盡量使用一次性手套 專用整套移液器 成套試劑和其他必需品, 避免外來 DNA 污染反應體系( 2) DNA 模板應稀釋為適宜的濃度, 使加入 PCR反應的 DNA 樣品體積zui好在 4 ~ 5 l 如果 DNA 模板樣品量太少, 僅有1 ~ 2 l, 不僅實驗操作難度大, 而且如果操作時間長, 會導致 DNA 反應液部分或全部蒸發掉, 影響 PCR 反應結果。

    293T細胞人胚腎細胞
    293T/17細胞 人胚腎細胞
    2V6.11細胞 人胚腎細胞
    3T3-L1細胞 小鼠胚胎成纖維細胞
    4T1細胞 小鼠乳腺癌細胞
    ( 3) 可以先將 DNA 樣品加到 PCR 管底部, 再加其他 PCR 反應混合液 加樣時選擇不同的方位加 DNA模板和其他 PCR 反應混合液, 這樣槍頭靠壁加樣時不會交叉污染。
    ( 4) 加樣完畢后, 蓋上蓋子, 混勻反應液, 再低速離心片刻( 1 min 左右) 如果不是立即進行 PCR 擴增, 需將 PCR 反應混合液置于 - 20 ℃保存備用。

    WISH細胞,人羊膜細胞
    Y1細胞,小鼠腎上腺皮質細胞
    YAC-1細胞,小鼠淋巴瘤細胞
    ZR-75-1細胞,人乳腺癌細胞
    ZR-75-30細胞,人乳腺癌細胞
    ( 5) PCR 擴增反應使用的酶不能長時間放置于室溫下, 須隨用隨取, 使用完畢后立即放回 - 20 ℃冰箱否則, 酶易失活。
    ( 6) PCR 反應的退火溫度應根據不同的引物來確定zui佳退火溫度, 以確保擴增的條帶中雜帶少, 目標帶明顯, 引物退火溫度一般按照 Tm = 4 ℃( G + C) + 2 ℃( A + T) 公式計算。

    TE-10細胞,人食管癌細胞
    TE-1細胞,人食管癌細胞
    Tca-8113細胞,人舌鱗癌細胞
    T-47D細胞,人乳腺管癌細胞
    T24細胞,人膀胱移行細胞癌細胞
    WEHI 231細胞,小鼠B 淋巴細胞
    WI-38細胞,人胚肺細胞
    293細胞 人胚腎細胞
    5637細胞人膀胱癌細胞
    6T-CEM細胞 人T細胞白血病細胞
    769-P細胞 人腎細胞腺癌細胞
    786-0細胞 人腎透明細胞腺癌細胞
    95-D細胞人高轉移肺癌細胞
    A172細胞人膠質母細胞瘤細胞
    A3細胞 人T淋巴細胞白血病細胞
    J82細胞人膀胱移行細胞癌
    A-431細胞 人表皮癌細胞
    A549細胞人非小細胞肺癌細胞
    A-673細胞 人橫紋肌瘤細胞
    A7r5細胞 大鼠胸大動脈平滑肌細胞
    A9細胞 小鼠皮下結締組織細胞
    AAV-293細胞 人胚腎細胞
    Acc-2細胞人涎腺腺樣囊性癌細胞
    Acc-3細胞人涎腺腺樣囊性癌細胞
    ACHN細胞 人腎細胞腺癌細胞
    AGS細胞 人胃腺癌細胞
    AML-193細胞 人急性單核細胞白血病單核細胞
    Ana-1細胞 小鼠巨噬細胞
    AR42J細胞大鼠胰腺外分泌細胞
    AsPC-1細胞 人轉移胰腺腺癌細胞
    AtT-20細胞 小鼠垂體瘤細胞
    B16細胞 小鼠黑色素瘤細胞
    BxPC-3細胞 人原位胰腺腺癌細胞
    BT-549細胞 人乳腺管癌細胞
    BT474細胞 人乳腺導管癌細胞
    BRL 3A細胞 大鼠肝細胞
    BRL細胞 大鼠肝細胞
    BNL CL.2細胞 小鼠胚胎肝細胞
    BGC-823細胞 人胃腺癌細胞
    Beta-TC-6細胞 小鼠胰島素瘤胰島β細胞
    BEL-7405細胞 人肝癌細胞
    BEL-7404細胞 人肝癌細胞
    BEL-7402細胞 人肝癌細胞


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