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  • 發布時間:2021-05-24 15:31 原文鏈接: PCR實驗室SOP文件(五)

    生物安全柜的使用與維護標準操作程序
    1 目的:保證生物安全柜內的高潔凈、 無污染。
    2 適用范圍:生物安全柜
    3 使用方法:
    3.1 檢查電源電壓是否匹配后,接通電源。
    3.2 生物安全柜工作前必須預先打開風機。
    3.3 生物安全柜工作時先關閉紫外燈,工作時不要將移門移過安全線的高度。     
    3.4 生物安全柜使用后即刻以5%施康消毒液洗擦工作臺面,再以75%酒精擦一次;紫外燈消毒30分鐘后關機。
    3.5工作臺面禁放不必要的物品,以保持工作區的潔凈氣流不受干擾。
    3.6 禁止在工作臺面上記錄書寫,工作時盡量避免作明顯擾動氣流的動作;禁止在預過濾進風口部位放置物品,以免擋住進風口造成進風量減少,降低凈化能力。
    3.7 經常用沙布沾上酒精將紫外線殺菌燈表面揩擦干凈,保持表面清潔,以免影響紫外燈消毒效果。
    4 本SOP變動程序:本SOP的變動,可由任一使用該文件的工作人員提出,報室
    技術負責人批準,如通過則公布實行。



    旋渦振蕩器使用與維護標準操作程序
    1.目的:保證待處理樣品的完全混勻。
    2.適用振蕩器范圍:各種類型的旋渦振蕩器。 
    3.標準操作:
    3.1旋渦振蕩器應置于堅固的水平臺上。
    3.2檢查電源電壓是否匹配后,接通電源。
    3.3 將樣品管垂直或略為傾斜的放置于振蕩盤上,開機振蕩數秒或數分鐘直至樣
    品完全混勻后,關機。
    3.4 切忌將樣品管平躺或倒轉振蕩,以免管內液體滲出。
    3.5 保持振蕩器清潔、干燥。
    4.該SOP變動程序:本SOP的變動,可由任一使用該文件的工作人員提出,報室
    技術負責人批準,如通過則公布實行。

     

     

    加樣器使用與維護標準操作程序
    1.目的:保證加樣器加樣的準確性。
    2.適用加樣器范圍:各種品牌、型號的固定、可調和多通道加樣器。
    3.標準操作:
    3.1設定容量值
        根據所需取液量選擇相應的加樣器;可調式加樣器應在允許容量范圍內調節。 連續可調式加樣器容量計讀數由三位撥號數字組成(顯示所轉移液體容量),從上(最大有效數字)到下(最小有效數字)讀取;利用底部刻度可將容量刻度調節到更精確的分度。
        本室使用Finnpipette(F型)加樣器是連續可調的、計量和移液的專用儀器。加樣器有各種不同的型號,F右下角數字為加樣器最大容量值,代表加樣器的型號已標明在按鈕上。容量范圍自0.5ul至1000ul(各型號容量范圍見括號內)。 
    F10(0.5—10ul)   F50(5—50ul)   F200(20—200ul)   F1000(200—1000ul)  以此類推。
    表1:F型加樣器的應用范圍
    F10 超微量計量及移液,應用于DNA定序及酶分析等。
    F50、F 200 和F1000 應用于一般水溶液、酸、堿的計量和移液。
    3.2 吸液和放液:
        首先選擇一支合適的吸嘴安放在加樣器套筒上。稍加扭轉地壓緊吸頭使之與套筒間無空氣間隙。未裝吸頭的加樣器絕不可用來吸取任何液體。最常用的吸液和放液方式有兩種。
    3.2.1前進式:    
    a) 吸液:把按鈕壓至第一停點; 垂直握持加樣器,使吸嘴浸入液樣中,浸入液體深度視型號而定:
      F10
      F50 和F40
      F200 和F1000       ≤1mm
         2--3mm
         2--4mm
    緩慢、平穩地松開按鈕,吸液樣,待移液器吸滿液體后等一秒鐘,然后
    將吸嘴提離液面,貼壁停留2-3秒,使管尖外側的液滴滑落。
      b)放液:將吸嘴貼到容器內壁并保持100—400傾斜。平穩地把按鈕壓到第一停點,放出液體,等1-2秒鐘后把按鈕壓到第二停點以排出剩余液體。壓住按鈕,停留1-2秒鐘,提起加樣器,松開按鈕。按吸嘴彈射器除去吸嘴。(只有改用不同液體時才需更換吸嘴。)
      c)加樣本等液體量較多時使用。
    3.2.2倒退式:
      a)吸液:把按紐壓到第二停點,垂直握持移液器,使吸嘴進入液樣中,緩慢平穩的松開按紐吸液樣。吸滿液體后,將管嘴撤出液面,貼壁停留2-3秒,使管尖液滴滑落。
      b)放液:將吸嘴貼到容器內壁,并保持100—400傾斜,輕輕按下按紐到第一點放出液體。遺留在管嘴尖的液體隨吸嘴一起扔掉或按至第二停點放回原來液體管中。
      c)此種方式適用于高粘度液體;易起泡沫的液體或極小量的液體。
    3.3 預洗
    當取液體積大于10 ul時,為了保證吸液的精密度和準確性,裝上一個新吸嘴(或改變吸取的容量值)時應預洗吸嘴,即先吸入一次液樣并將之排回原容器中,反復2-3次。這是因為第一次吸取的液體會在吸嘴內壁形成液膜,導致計量誤差。而同一吸嘴在連續操作時液膜相對保持不變,故第二次吸液即可消除誤差。
    而當液體體積小于10 ul,只有在沒有預洗,同時要將吸取的液體在要轉入的液體中反復吸打幾次,排空液體,再將吸嘴提出并貼壁停留1-2秒,才能保證取液的精密度和準確度。
    3.4 致密及粘稠液體
    對于密度低于水的液體,可將容量計的讀數調到低于所需值來進行補償。
    例如:用F50加樣器轉移10 ul血清。先將讀數調到10ul,吸取后以重量法測定。
    如實測體積為9.5ul,即偏差0.5ul,則將讀數調到10.5ul并重復一次。如第二
    次仍不夠準確,根據偏差再作調整。
         排放致密或粘稠液體時,宜在第一停點多等一兩秒鐘再壓到第二停點。


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