POCT,快速檢驗(point-of-care testing),指在病人旁邊進行的臨床檢測(床邊檢測bedsidetesting),通常不一定是臨床檢驗師來進行。是在采樣現場即刻進行分析,省去標本在實驗室檢驗時的復雜處理程序,快速得到檢驗結果的一類新方法。國外曾有不少與POCT相關的名詞,如 bedside testing(床邊檢測)、near-patient testing(病人身邊檢測)、physicians`office testing(醫師診所檢驗)、home use testing(家用檢驗)extra-laboratory testing(體外檢測)和decentralized testing(分散檢驗)等。隨著這一領域的不斷發展,這些名詞都已不能概括POCT的含義。
POCT的主要標準是不需要固定的檢測場所,試劑和儀器是便攜式的,并且可及時操作。POCT還具有快速獲得檢測結果、操作簡便、容易使用和節約成本等優點,這也使得POCT在在人們的日常生活著發揮著越來越大的作用。
POCT涉及的技術多種多樣,概而言之,可以分為簡單顯色、酶標記、免疫分析、光學和電學生物傳感器、電化學檢測、分光光度和生物芯片等。這里,就化學發光免疫分析POCT作下介紹。之所以選擇化學發光免疫分析,是因為它兼有免疫反應的特異性,同時又結合化學發光的高靈敏度,可以極大地擴寬常規免疫分析方法的檢測范圍。
化學發光免疫分析(Chemiluminescence Immunoassay, CLIA)是近十年來在世界范圍內發展非常迅速的非放射性免疫分析,是繼酶聯免疫技術(EIA)、放射免疫技術(RIA)、熒光免疫技術(FIR)之后發展起來的一種超高靈敏度的微量測定技術。它具有高靈敏度、檢測范圍寬、操作簡便快速、標記物穩定性好、無污染、儀器簡單經濟等優點。它是放射性免疫分析與普通酶免疫分析的取代者,是目前免疫定量分析最理想的方法。該技術利用化學反應釋放的自由能激發中間體,使其從激發態回到基態,釋放出等能級的光子,經化學發光免疫分析儀對光子的測定,精確定量被測物含量。CLIA發展迅猛,已占各種免疫分析的首位。
化學發光反應參與的免疫測定分為以下幾種類型:
(一)化學發光酶免疫測定
化學發光酶免疫測定(chemiluminescence enzyme immunoassay, CLEIA)是采用化學發光劑作為酶反應底物的酶標記免疫測定。經過酶和發光兩級放大,具有很高的靈敏度。以過氧化物酶為標記酶、以魯米諾為發光底物、并加入發光增強劑以提高敏感度和發光穩定性。應用的標記酶也可以為堿性磷酸酶,發光底物為dioxetane磷酸酯,固相載體為磁性微粒。

(二)化學發光免疫測定
化學發光免疫測定(CLIA),是用化學發光劑直接標記抗原或抗體的一類免疫測定方法。吖啶酯是較為理想的發光底物,在堿性環境中即可被過氧化氫氧化而發光。用作標記的化學發光劑應符合以下幾個條件:.能參與化學發光反應; 與抗原或抗體偶聯后能形成穩定的結合物試劑;偶聯后仍保留高的量子效應和反應動力;.應不改變或極少改變被標記物的理化特性,特別是免疫活性。魯米諾類和吖啶酯類發光劑等均是常用的標記發光劑。
該免疫分析技術有兩種方法:(1)小分子抗原物質的測定采用競爭法:用過量包被磁顆粒的抗體,與待測的抗原和定量的標記吖啶酯抗原同時加入反應杯溫育,其免疫反應的結合形式有兩種,一是標記抗原與抗體結合成復合物;二是測定抗原與抗體的結合形式;(2)大分子的抗原物質測定采用雙抗體夾心法:標記抗體與被測抗原同時與包被抗體結合成一種反應形式,即包被抗體-測定抗原-發光抗體的復合物。
(三)電化學發光免疫測定
電化學發光免疫測定(ECLI)是一種在電極表面由電化學引發的特異性發光反應,包括電化學和化學發光兩個部分。分析中應用的標記物為電化學發光的底物三聯吡啶釕或其衍生N-羥基琥珀酰胺(NHS)酯,可通過化學反應與抗體或不同化學結構抗原分子結合,制成標記的抗體或抗原。ECLL的測定模式與ELISA相似。其基本原理是發光底物二價的三聯吡啶釘及反應參與物三丙胺在電極表面失去電子而被氧化。氧化的三丙胺失去一個H+而成為強還原劑,將氧化型的三價釕還原為激發態的二價釕,隨即釋放光子而恢復為基態的發光底物。這一過程在電極表面周而復始地進行,不斷地發出光子而常保持底物濃度的恒定。
無論是哪種類型的免疫測定方法,所產生的光通過相應的電子儀器進行收集和測量之后,就可以精確地測出待測物質的含量,從而實現臨床監控病人體內生理指標的動態變化,同時也便于醫生作出準確的判斷并采取合適的療法。
目前在化學發光免疫檢測領域,羅氏相關產品在中國的市場占有率大約在47%,雅培大約為26%、貝克曼大約為15%,西門子大約為6%等,而國內公司占領的市場份額依然比較單薄。不光化學發光免疫檢測POCT如此,其他方面的POCT大抵也是這種情形。
隨著經濟的快速發展和人們對自身健康的越來越重視,POCT的市場蛋糕定會越來越大,但是這一領域相對而言比較成熟,市場競爭異常激烈。國外巨頭羅氏、強生、雅培和拜耳等早已攜技術、產品質量和售后服務優勢搶灘中國,占據大部分份額。而本土企業起步較晚,如何利用現有成熟技術,在這塊紅海中殺出一條血路,乃至尋找出新的藍海,就不得不制定好良好的發展策略,同時利用本土優勢,發展和壯大自己,進而走出國門,逐鹿全世界。