PVDF膜上蛋白的可逆染色可以用于:Western雜交時,確認蛋白是否轉至PVDF膜上。
| 實驗方法原理 | 麗春紅帶負電荷,可以與帶正電荷的氨基酸殘基結合,同時也可以與蛋白質的非極性區相結合,從而形成紅色的條帶。 |
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| 實驗材料 | |
| 試劑、試劑盒 | AmidoBlackisopropanolaceticacid考馬斯亮藍methanolPonceau S in TCAEtOHHACNa2S2O3AgO3Na2CO3MeOHAgNO3甲醛 |
| 儀器、耗材 | |
| 實驗步驟 | 1. 氨基黑染色 染液:0.5% Amido Black (w/v), 25% isopropa nol (v/v) and 10% acetic acid. 染色:將 PVDF 膜置于染液中染色數鐘,ddH2O脫色。 2. 考馬斯亮藍染色 染液:0.1% Coomassie Brillia nt Blue R-250 (w/v) and 50% met hanol (v/v) 脫色液:40% met hanol (v/v) with 10% acetic acid (v/v) 染色:將 PVDF 膜置于染液中染色 15 min.,脫色液脫色。 3.麗春紅染色 Ponceau S 染液:0.2% w/v Ponceau S in TCA (3% v/v) 染色:將 PVDF 膜置于染液中染色 5min 脫色:ddH2O脫色
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| 注意事項 | 麗春紅染色液不適用于尼龍膜上蛋白的檢測。 |
| 其他 | 麗春紅的染色靈敏度不如考馬斯亮藍染色液。 |