PVDF膜上蛋白的可逆染色

實驗材料 蛋白

試劑、試劑盒 AmidoBlackisopropanolaceticacid考馬斯亮藍methanolPonceau S in TCAEtOHHACNa2S2O3AgO3Na2CO3MeOHAgNO3甲醛

儀器、耗材 PVDF膜

實驗步驟

Western 雜交時，為確認蛋白是否轉至 PVDF 膜上，可用下列方 法對膜上蛋白進行可逆性染色。

1.  氨基黑染色

染液：0.5% Amido Black (w/v), 25% isopropa nol (v/v) and 10% acetic acid.

染色：將 PVDF 膜置于染液中染色數鐘，ddH2 O 脫色。

2. 考馬氏亮藍染色

染液：0.1% Coomassie Brillia nt Blue R-250 (w/v) and 50% met hanol (v/v)

脫色液：40% met hanol (v/v) with 10% acetic acid (v/v)

染色：將 PVDF 膜置于染液中染色 15 min.，脫色液脫色。

3．麗春紅染色 Ponceau S

染液：0.2% w/v Ponceau S in TCA (3% v/v)

染色：將 PVDF 膜置于染液中染色 5min

脫色：ddH2O 脫色