2.3 樣品制備
取鹽酸美金剛片雜質 N-（二甲基金剛烷）甘氨酸對照品儲備液，逐級稀釋后制成含 N-（二甲基金剛烷）甘氨酸 0.12、 0.6、1.2、 6.0、 12.0、 60、 120、 600、 1200、 6000、 12000 ng/ml（ppb）的溶液，分別按上述不同掃描模式進樣分析。
3. 結果
3.1 全掃描（FullScan）
全掃描 FullScan 定量記錄的是所有進入檢測器的離子信號，然后通過精確分子量提取獲得目標化合物質譜響應進而實現定量。圖 4 為 0.6、 1.2、 6.0 ng/ml 三個濃度全掃描下目標化合物的提取離子流信號，即使在 0.6 ng/ml 濃度下，上樣量僅為 0.6 pg，全掃描仍能檢測到目標化合物離子明顯的信號， 1.2 ng/ml 濃度下信號強度進一步提高，且提取離子流窗口都使用了統一的5 ppm（0.0012 amu），表明 QE Focus 在極低濃度下可以保持出色的質量精度。
圖 4. 全掃描 0.6 PPb、1.2 PPb、6.0 PPb 濃度下提取離子流色譜圖
考察全掃描定量的線性范圍和重現性。 N-（二甲基金剛烷）甘氨酸的一級全掃描精確質量數 XIC 色譜圖， 1.2 ng/ml~12 μg/ml 標準曲線見圖 5， 1.2 ng/ml 和 120 ng/ml 兩個濃度下各 5 針精密度見圖 6。
圖 5. 全掃描定量線性范圍（1.2 ng/ml~12 μg/ml）
圖 6. 全掃描定量精密度（1.2、 120 ng/ml）
結果表明， N-（二甲基金剛烷）甘氨酸在 1.2 ng/ml~12 μg/ml 線性關系良好， Y=-138720+362674X-1.44506X2， R2=1.0000，各濃度點的偏差都在 5% 以內。在 1.2 ng/ml 定量下限和 120 ng/ml 高濃度下重現性均良好， 5 針 RSD 均小于 4%
3.2 選擇離子監測（SIM）
選擇離子監測 SIM 高分辨定量通過四極桿對目標化合物進行選擇性通過，然后將目標化合物送入 Orbitrap 進行高分辨掃描。通過四極桿的篩選和過濾，可去除大量的干擾離子，使目標化合物更多的進入檢測器，然后通過一級精確質量數的提取進行定量。比較 0.12 ng/ml SIM 模式下提取離子流信號 , 結合 AGC 值和各濃度下離子注入時間 , 可知在 0.12 ng/ml 濃度下進入 Orbitrap 檢測器的目標化合物離子數目大幅增加。即使濃度比全掃描降低 10 倍，仍可獲得較好的峰型。
但在定量過程中，常存在同質異素甚至同分異構體的干擾，通過一級精確質量數無法獲得與目標化合物的有效區分，例如在 SIM 模式下各濃度 XIC，可觀察到 6.2 min 存在干擾峰（圖7 藍色虛線框部分）。
圖 7. 選擇離子監測 0.6 PPb、 1.2 PPb、 6.0 PPb 濃度下提取離子流色譜圖
從圖 8 一級質譜數據中可以看出， 6.2 min 的峰中存在m/z238.014 的干擾離子，與目標雜質 N-（二甲基金剛烷）甘氨酸非常接近，僅相差 0.5 ppm，無法通過一級質譜對兩者加以區分。
圖 8. N-（二甲基金剛烷）甘氨酸和干擾峰一級質譜比對