QuEChERS樣品前處理_液相_省略_中66種有機磷農藥殘留量方法評估

摘要: 比較了兩種版本QuEChERS 方法( 即發表于2003 年未加緩沖鹽的原創QuEChERS 方法及加乙酸鹽緩沖液的AOAC 2007. 01 方法) 提取蔬菜中66 種有機磷農藥( OPPS) 的有效性; 考察了乙二胺-N-丙基硅烷( PSA) 及C18 吸附劑對66 種OPPS 的吸附作用; 以提取后添加法評估了青花菜、番茄、枝豆、蘿卜、大蔥基質中各目標物液相色譜-串聯質譜( LC-MS /MS) 分析的基質效應。結果表明，加入乙酸鹽緩沖液的QuEChERS 方法對一些OPPS 有較高及較穩定的回收率; PSA 及C18 吸附劑可吸附二溴磷，QuEChERS 樣品前處理方法不適于二溴磷分析; 5 種樣品基質中青花菜的基質效應最大。據此采用AOAC 2007. 01 方法并優化LC-MS /MS 分析參數，一次進樣監測132 對離子對( 每個化合物2 對離子對) 分析蔬菜中66 種OPPS 殘留量，除二溴磷外， 65 種OPPS 在5 種基質( 青花菜、番茄、枝豆、蘿卜、大蔥) 、3 個添加水平( 10、40、80 μg /kg) 的回收率為55%～ 122%，相對標準偏差為1. 6%～ 18%，定量限( 以信噪比( S /N) ≥10 計) 為0. 1 ～ 8 μg /kg。以上結果說明該法有效、耐用、靈敏，符合法規殘留限量監測要求。

    有機磷農藥因具有廣譜、高效、降解快等特點而成為世界上應用最廣泛的農藥之一，其主要作用機制為抑制乙酰膽堿酯酶的活性，具有神經毒性; 一些有機磷農藥還有致突變、致癌等毒性［1］。世界各國均制定了食品中有機磷農藥殘留限量法規［2］; 對于未制定最大殘留限量的農業化學品及未注冊的農藥，日本及歐盟所設定的最大殘留限量為10 μg /kg或更低［2，3］。
蔬菜中有機磷農藥的多殘留測定方法有氣相色譜法( GC) ［1，4，5］、氣相色譜-質譜法( GC-MS) ［6，7］、氣相色譜-串聯質譜法( GC-MS /MS) ［3，8，9］、液相色譜-串聯質譜法( LC-MS /MS) ［3，7， 10 －15］。有機磷農藥品種多，各個農藥的物理化學性質差別很大［16］，一些化合物的相對分子質量小、極性強、熱穩定性差，不宜采用GC 分析。Mol 等［10］采用LC-MS /MS 測定
果蔬中6 種不適于GC 分析的有機磷農藥，文獻［3，7， 11 －13］采用LC-MS /MS 測定果蔬中各類農藥多殘留，其中包含的有機磷農藥最多為22 種。
    GB /T 20769-2008［14］雖包含所有有機磷農藥，但有13 種只能定性而未能定量，有20 種檢出限高于10μg /kg。葉瑞洪等［15］采用LC-MS /MS 測定果蔬及其他基質中61 種有機磷農藥多殘留，需2 次進樣分析，增加了儀器分析時間及儀器污染。
    果蔬中農藥多殘留檢測樣品前處理的傳統方法為乙腈提取、NaCl 鹽析分層、固相萃取小柱凈化［14］。QuEChERS 樣品前處理方法于2003 年由Anastassiades 等［17］提出，與傳統方法不同的是，采用MgSO4鹽析分層和分散固相萃取( DSPE) 凈化;2005 年該方法又進行了修改，針對一些酸堿敏感農藥，引入了乙酸緩沖鹽提取體系［18］，該修改后的方法于2007 年成為美國官方分析方法( AOAC2007. 01) ［7］; 之后，歐盟又于2008 年發布了其官方分析方法EN15662，該QuEChERS 方法采用了較弱酸性的檸檬酸緩沖鹽為提取體系［19］。基質效應是LC-MS /MS 多殘留分析可靠定量的最大難題，又稱為LC-MS /MS 定量方法的“Achilles heel”［20， 21］，減小樣品的基質效應對獲得準確的回收率至關重要。對基質效應進行評估，可指導方法改進并采取有效的基質效應補償措施，但目前評估基質效應的文獻較少，僅查閱到兩篇( 文獻［3， 19］) 。
    本文比較了兩種QuEChERS 樣品前處理方法提取蔬菜中66 種有機磷農藥的有效性，即未加入緩沖鹽的原創QuEChERS 方法［17］及加入乙酸鹽緩沖液的AOAC 2007. 01 方法［7］; 考察了乙二胺-N-丙基硅烷( PSA) 及C18 吸附劑對66 種有機磷農藥的吸附作用; 以提取后添加法［20， 21］考察了青花菜、番茄、枝豆、蘿卜、大蔥基質中各目標物LC-MS /MS 分析的基質效應。通過優化LC-MS /MS 分析參數以提高靈敏度，應用儀器工作軟件以按時間表的多反應監測( Scheduled MRM) 采集模式，一次進樣即可完成66 種化合物的定性定量分析。