問:R&amD Systems有分裝試劑嗎?
答:沒有分裝試劑。R&amD
Systems公司不會分裝,也沒有授權任何公司進行分裝。目前市場上所謂的“RD分裝試劑”是沒有品質保證的3無產品,R&amD
Systems公司不承擔任何“RD分裝試劑”的售后服務。在此,建議廣大客戶和經銷商從R&amD
Systems中文網站上公布的正規經銷商處訂購。
問:R&amD Systems有分裝試劑嗎?
答:沒有分裝試劑。R&amD
Systems公司不會分裝,也沒有授權任何公司進行分裝。目前市場上所謂的“RD分裝試劑”是沒有品質保證的3無產品,R&amD
Systems公司不承擔任何“RD分裝試劑”的售后服務。在此,建議廣大客戶和經銷商從R&amD
Systems中文網站上公布的正規經銷商處訂購。
抗體
問:目錄中抗體的名稱有AB, AF, BAF, MAB之分,它們有何不同?
答:帶有AB的抗體是用G蛋白純化的,帶有IgG成分;帶有AF的抗體經G蛋白純化后又經抗原親和層析純化。所以,AF抗體為抗原特異性的IgG,而AB抗體含有與目標分析物非特異性的IgG。BAF是生物素化的AF抗體;MAB是單克隆抗體。
問:IgG的分子量是多少?
答:IgG的分子量是150kDa。它由兩條50kDa的重鏈和兩條25kDa的輕鏈組成。
問:某一單克隆抗體所識別的抗原表位是什么?
答:R&amD Systems不做抗原表位的定位。抗體是針對整個免疫原(列在數據表中)的。
問:某一多克隆抗體所識別的抗原表位是什么?
答:多克隆抗體有多個抗原表位識別位點。抗體是針對整個免疫原(列在數據表中)的。
問:什么是Thehalose?它為什么在這個抗體上?
答:Thehalose是一種非還原糖(分子量為342.1),
它在梅拉德式(Maillard)反應中與氨基酸和蛋白都不作用。它存在于許多植物和動物中。有報道稱Thehalose是穩定蛋白抗御冰凍的最有效抗凍劑,它使得蛋白抵御水分的能力增加從而使產品在重新溶解時不容易產生沉淀物。
問:采用Trehalose穩定蛋白的原因是什么?
答:Trehalose主要用于在冰凍和脫水過程中保護蛋白。它是非還原糖,在干粉化時呈非結晶狀。
細胞凋亡
問:為什么有兩套不同的TUNEL試劑盒?
答:因為有兩種不同的TUNEL方法可檢測細胞凋亡。第一種方法采用TdT酶(末端脫氧核苷酸轉移酶)將生物素化的核苷酸加到組織中的DNA片段的3'-羥基端。加入正離子可使這種標記更有效,經生物素化的核苷酸可用streptavidin-HRP共軛物和底物來檢測。
第二種方法仍采用TdT酶(末端脫氧核苷酸轉移酶)將核苷酸加到樣本中的DNA片段的3'-羥基端,但采用5-溴脫氧尿苷(BrdU)標記而非生物素,再用生物素化的抗5-溴脫氧尿苷(BrdU)抗體來檢測。采用這種方法的細胞凋亡檢測試劑盒包括:TA100
TACS-XL基本原位細胞凋亡試劑盒;TA200 TACS-XL DAB原位細胞凋亡試劑盒;TA300
TACS-XL藍色標記原位細胞凋亡試劑盒;TA400 TACS-XL補充細胞凋亡試劑盒;
問:Caase活性測試是如何使用的?
答:Caase活性測試為在細胞裂解液中檢測蛋白酶活性提供了簡捷方便的手段。當對專一Caase的多肽底物被裂解時,釋放出的指示分子可用普通讀光儀或熒光讀板儀來做定量測定。將從細胞凋亡樣本得到的信號同未經誘導的對照樣本進行比較,可以確定Caase活性增加的倍數,而Caase酶活性是同檢測到的信號直接成正比。
問:Caase活性測試是否可用于定量檢測?
答:R&amD
Systems的Caase活性測定試劑盒可作為半定量測試。檢測結果最好用于測量在細胞凋亡細胞中與未經誘導細胞中的Caase活性倍數的增加。實驗時,最好采用本底對照(無細胞裂解液或無底物的反應)。如果本底對照也有一定的讀數,這一讀數應當在記算倍數增加之前從試驗數據中差減。
問:Caase活性檢測同Caase ELISA試劑盒有何不同?
答:Caase活性檢測用于測定不同Caase的蛋白酶的活性,表達為比未誘導樣本的倍數增加。Caase ELISA試劑盒用于測定不同Caase在樣本中的含量,以pg /mL定量表達。
問:caase X活性測試是對caase X專一的嗎?
答:大多數caase會裂解所有的底物,它們根據Michaelis-Menton動力學趨于選擇某一底物而非另一底物,但沒有任何底物是對某一Caase專一的。比如,Caase
3和Caase 7都可裂解DEVD底物;Caase 9、4、5 都可裂解LEHD。R&amD
Systems為每一Caase選擇了它所適宜的底物。 如果反應進行的太久,一些Caase會激活另一些Caase。
問:Caase活性檢測試劑盒中的細胞裂解液是否同其它試劑盒中的一樣?
答:所有的Caase活性檢測試劑盒中的細胞裂解液都是一樣的。所以,可用它裂解細胞,和用于多種Caase活性的測試。
問:R&amD Systems的Caase抑制劑是否可逆?
答:所有R&amD Systems的Caase抑制劑在N端有苯甲氧碳基(Z-)和FMK功能組,它們可穿孔細胞,是不可逆轉的。
問:R&amD Systems是否為Caase活性檢測提供陽性對照?
答:R&amD
Systems提供多種重組Caase酶,它們是理想的陽性對照。如果試驗者自己想建立一陽性對照,有許多可以產生細胞凋亡的陽性對照的方法都已發表。如果將細胞同2
mM星形孢菌素(Stauroorin)溫育2小時,可誘導絕大多數細胞類型進入細胞凋亡。R&amD
Systems有文獻資料列舉了對Caase如何產生陽性對照,可向我們的技術服務索取。