RNAi的作用機制(起始階段和效應階段)

現有的RNAi作用機制模型包括起始階段和效應階段:

1）起始階段：dsRNA進入細胞的方式可以是外源導入或者轉基因、病毒感染等。引入的dsRNA被核酸酶RNaseⅢ家族中特異識別dsRNA的Dicer酶,以一種ATP依賴的方式逐步切割成長約 21-23nt的由正反義鏈組成的雙鏈小分子干擾RNA(siRNA)，且每條單鏈的3’端都帶有2個突出的非配對堿基（多數是UU）。siRNA又被稱為引導RNA（guide RNA）,是識別靶RNA的標志。siRNA的生成啟動了RNAi反應。

2)效應階段：siRNA結合一個核酶復合物，形成所謂的RNA誘導的沉默復合物（RNA-induce silencing complex,RISC）。這個核酶復合物由內切核酸酶、外切核酸酶、解旋酶和同源RNA搜索活性蛋白四種成分組成。激活該復合物需要一個ATP依賴的將siRNA解雙鏈的過程，活化以后的RISC定位到與siRNA中的反義鏈互補的靶mRNA轉錄本上，并在距離siRNA3　’端12個堿基的位置切割 mRNA。另外，通過遺傳分析方法發現，線蟲中的RDE-1、MUT-7和DNA/RNA解旋酶及其他PAZ/Piwi蛋白也參與到該階段的反應。