RTPCR與WB結果的變化趨勢相反

RT-PCR 與WB結果的變化趨勢并不總是一致的,可以從以下幾個方面來解釋：
1、基因的表達分為轉錄和翻譯兩個層面，即mRNA水平和蛋白水平。而真核基因表達的轉錄和翻譯發生的時間和位點存在時空間隔；
2、在轉錄后，又會有轉錄后加工，轉錄產物的降解，翻譯，翻譯后加工及修飾好幾個層面。所以轉錄水平和翻譯水平并不完全一致，且這種調節在不同蛋白質之間存在差異；
3、mRNA與蛋白質的半衰期不同，mRNA極易降解，在組織內存在時間較短，而翻譯成蛋白質后性質較穩定；
4、正常狀態下，細胞內可能存在一定量的蛋白質儲備，不行使功能，而這種儲備量的多少在不同組織有所不同；
5、與檢測方法有關，RT-PCR檢測mRNA的靈敏度非常高，理論上只要有一個拷貝的目的基因即可檢測；
6、蛋白質是行使功能的基本單位，所以歸根結底要落實到蛋白水平究竟怎么變化，從而判斷其對相應功能的影響。

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