SDSPAGE染色一般要3min。
十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是在聚丙烯酰胺凝膠電泳中引用了SDS,是最常用的一種蛋白表達分析技術根據檢體中蛋白質分子量大小的不同,使其在電泳膠中分離。
SDS-PAGE實驗步驟:
1、組裝膠板時檢查封閉是否完全。否則跑出來的膠形狀可能千奇百怪甚至無法電泳。
2、灌膠操作時膠一定要沿玻璃板流下,避免膠中才產生氣泡。加水液封時要慢,不要將膠沖變型。
3、上樣時保證每個泳道的樣品量一致,否則會導致泳道寬窄不一。點樣時不要引入氣泡。
4、打開電源進行電泳時一定要等到電壓穩定后離開。
5、電泳結束后先關掉電源再取出玻璃板。取膠時動作要輕。使用考馬斯亮藍染液染色時可在搖床上染色過夜,也可在微波爐中加熱煮沸進行染色。
6、使用脫色液脫色時要經常換脫色液,直至蛋白質帶清晰為止。
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