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  • 發布時間:2020-06-10 11:42 原文鏈接: TL2020全自動冷凍研磨機研磨玉米葉片的試驗方法

    目的:

    批量研磨玉米葉片,為后續提取核酸,進行遺傳或生理生化指標分析研究提供方便。為種子和農產品質量管理部門、種子公司等單位利用分子方法檢測樣品純度、檢測純度真實性等實驗所必需的樣品前處理工作提供參考。

    地點:某種業育種和栽培實驗室

    材料:新鮮玉米幼苗葉片

    儀器:主機,TL2020全自動冷凍研磨機(又名TL2020高通量組織研磨儀);配件:2ml研磨適配器,直徑3或5mm研磨鋼珠

    步驟:

    1)取樣:取新鮮玉米幼苗葉片,剪成直徑6~8mm大小碎片;

    2)將3-5片葉片碎片置于2ml離心管(EP管)中,同時加入1顆5mm和2顆3mm不銹鋼研磨鋼珠。

    3)將加入葉片和研磨鋼珠的EP管關蓋密封,放入TL2020全自動冷凍研磨機的2ml研磨適配器中,然后和適配器一起整體進入液氮冷凍2-3分鐘或至液氮不“沸騰”為止。

    4)使用DHS特制的冷凍提籃迅速從液氮中取出適配器,并迅速將其固定在研磨儀的搖臂中;

    5)設置TL2020的研磨時間為2分鐘,研磨頻率1500rpm(1500次/分鐘)。

    結果:

    可以得到非常細碎的葉片粉末,提取核酸效果很好。

    結論:

    用TL2020全自動冷凍研磨機進行玉米葉片的冷凍研磨,可以直接將研磨管和適配器浸泡在液氮里,只需一次性1-2分鐘的液氮冷凍和一次約2分鐘的研磨,就能批量粉碎多達54個2.0ml的樣品(用96孔深孔板的話則是192個樣品)。處理時間迅速,有效防止了溫升,為后續有效提前核酸提供了保障。此外,還大大節省液氮,操作也更加安全。


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