1. 用無菌鑷子將一無菌蓋玻片放入 35 mm 培養皿中。
2. 將大約 1X104 細胞接種于無菌蓋玻片上，培養 24~48 小時。凋亡誘導時，細胞鋪滿不超過 80%。如細胞貼壁不太好，可以用纖連蛋白、聚賴氨酸或血清預處理蓋玻片，以使細胞更好地貼壁生長。
3. 誘導凋亡后，用 pH 7.2 的 PBS 輕輕洗細胞 1 次，不要除去垂死細胞，用冰冷的甲醇固定 10 分鐘。
4. 室溫空氣干燥玻片 5 分鐘，在 pH 7.2 的 PBS 中溫育 10 分鐘重新水合。
5. 按上述方法進行 TUNEL 反應。將合適的 Parafilm 膜放入溫室，膜上加 50 μl TdT 反應混合液，放蓋玻片，細胞朝下在反應液上。37℃ 孵育 1 小時。
6. 從室溫中取出蓋玻片，放回 35 mm 培養皿中。用 PBS 洗細胞 3 次，用 FlooroGuard 固定液固定到載玻片上。
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