10X麗春紅染液
麗春紅S 2g
三氯乙酸 30g
磺基水楊酸 30g
蒸餾水至 100ml
使用時將其稀釋10倍。
TBS緩沖液(100mmol/ L Tris?HCl pH7.5,150mmol/L NaCl)
1 mol/ LTris?HCl(pH7.5) 10ml
NaCl 8.8g
蒸餾水至 1000ml
TBST緩沖液(含 0.05%Tween20的TBS緩沖液)
20%Tween20 1.65ml
TBS 700ml
混勻后即可使用,最好現用現配。
封閉液(含5%脫脂奶粉的TBST緩沖液)
脫脂奶粉(國產,安怡牌) 5g
TBST 100ml
溶解后4℃保存。使用時,恢復室溫,用量以蓋過膜面即可,一次性使用。
洗脫抗體緩沖液(100mmol/L 2-Mercaptoethanol,2%SDS,62.5m mol/L Tris?HCl pH6.8)
14.4 mol/L 2- Mercaptoethanol(β-巰基乙醇) 700 ml (通風廚里加)
SDS 2g
0.5mol/L Tris?HCl(pH6.8) 12.5ml
超純水至 100ml
配制時,在通風廚內進行。 4℃保存。可重復使用1次。
顯影液(5X)
自來水(加熱至50℃) 375ml (以下藥品加到溫水中)
米吐爾 1.55g
亞硫酸鈉(無水) 22.5g
碳酸鈉(無水) 33.75g
溴化鉀 20.95g
補水至 500ml
配制時,上述藥品應逐一加入,待一種試劑溶解后,再加入后一種試劑。4℃保存。使用時用自來水稀釋至1倍。
定影液
自來水(50~60℃) 700ml (以下藥品按順序加入前者溶解后再加后者)
硫代硫酸鈉 240g
亞硫酸鈉(無水) 15g
冰乙酸 12.6ml
硼酸 7.5g
鉀明礬 15g(水溫冷至30℃以下時再加入)
加水定容至1000ml,室溫保存
抗體
用TBST稀釋至一定濃度使用,每張膜需0.5ml
化學發光試劑
購自北京中山公司,為Santa Cruz產品,分A和B兩種試劑。