WesternBlot實驗試劑的準備工作

1. 30%儲備膠溶液： 丙烯酰胺（Acr） 29.0g
　　　　　　　　　　　亞甲雙丙烯酰胺（Bis） 1.0g
　 混勻后ddH2O，37℃溶解，定容至100ml，棕色瓶存于室溫。

2. 4×分離膠緩沖液（1mol/L Tris-HCl PH 8.8） Tris 18.17g加ddH2O溶解，濃鹽酸調PH 8.8，定容至100ml。

3. 4×濃縮膠緩沖液（0.5mol/L Tris-HCl PH 6. 8） Tris 12.1g加ddH2O溶解，濃鹽酸調PH 6. 8，定容至100ml。

4. 10%SDS：電泳級SDS 10.0g加ddH2O，68℃助溶，濃鹽酸調PH 7.2，定容至100ml。

5. 5×電泳緩沖液（PH 8.3）： Tris 15.2g
甘氨酸 94g
ddH2O 定容到1000ml
SDS 5g
　　先在974ml蒸餾水中加入Tris堿，待溶解完全后，再加甘氨酸，最后加SDS。

6. 10%過硫酸銨（AP）：0.1g AP加ddH2O至1.0ml，4℃保存，要在一周內使用，最好新鮮配制。

7. 2×加樣緩沖液：2×SDS加樣緩沖液
　　　0.5mol/L Tris-HCl (PH 6.8) 2ml
　　　 10%SDS 4 ml
　　　β-巰基乙醇 1ml
　　　甘油 2ml
　　　1%溴芬藍 1ml
　　　置4℃避光保存

8. TEMED：注意室溫較低時TEMED量可加倍，最后灌膠之前再用

9. 轉膜緩沖液(Towbin transfer Buffer)： 即1×SDS-PAGE

10. 0.0 1mol/L PBS (PH 7.4) ： NaCl 8.5g
　　　　　　　　　　　　　　　(12H2O)Na2HPO4 2.9011g
　　　　　　　　　　　　　　　(2H2O)NH2PO4 0.24g
　　　　　　　　　　　　　加ddH2O定容至 1000ml

11. 封閉液: 1×PBS中加入 30ml
　　　　　　　　　　　5%（V/V）脫脂奶粉 1.5g
　　　　　　　0.02%疊氮鈉 0.006g
　　　　　　　0.05%Tween-20 0.015g

12. 漂洗液（PBST）：含0.05% Tween-20的PBS溶液
　　每1000 ml PBS溶液中加0.5 ml Tween-20

13. 水飽和正丁醇： 正丁醇 50 ml
　　　　　　　　　ddH2O 5 ml 加入瓶中震蕩，使結合，存于室溫。
　　用時取上面一相加在凝膠上面。

14. 考馬斯亮藍染色法試劑：一般用G250考馬斯亮藍（蛋白定量專用）
染色液： 90 ml甲醇：水（1：1，V/V）和10 ml冰乙酸的混合液中溶解G250馬斯亮藍0.25g，用Whatman 1號濾紙過濾染液以去除顆粒狀物質。（染色液多次回收利用）
　　　　　　　　　脫色液：90 ml甲醇：水（1：1，V/V）和10 ml冰乙酸的混合液

15. 麗春紅S染色色法試劑：2%乙酸，
　　　　　　　　　　　　　0.5%麗春紅的水溶液
　　脫色液：TBS

16. Aprotinin:為一58氨基堿性多肽，經反復凍融后，會發生集聚，儲存液應分裝成小份，保存于-20度，每一小份用后應予廢棄。

17. PMSF：在溶液中不穩定，應在臨用前從儲存液中現加于裂解液中。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF，應立即用大量的水沖洗。凡被PMSF污染的衣物應予丟棄。PMSF通常配成10mmol/L濃度儲液（1.74或17.4mg/ml溶于異丙醇中）保存于-20度。

18. 顯色液：聯苯胺顯色液（DAB）
　　　　　DAB 2ml
　　　　　10%H2O2 60μl
　　　　　PBS(0.1mol/L PH6.4) 10ml

19. 三去污裂解緩沖液
0.5mol/L Tris-HCl(PH 8.0) 0.785g/100ml
0.15mol/L NaCl 0.8775 g/100ml
0.02%疊氮鈉 0.02 g/100ml
0.1%SDS 0.1 g/100ml