裂解液是**普遍使用的蛋白提取試劑,可根據文獻或經驗自行配制,也可購買商業化的產品。常見的細胞裂解液有 NP40、Triton X-100、RIPA buffer 等。下表是根據目的蛋白的不同定位選擇裂解液的建議。雖然裂解液的使用范圍比較廣泛,能夠滿足總蛋白的提取,但是無法做到特異蛋白的提取,特別是遇到低豐度蛋白或者活性蛋白功能分析時,通用型的裂解液存在很大的局限性。
樣品類型 | 裂解液(Sigma-Aldrich) |
全細胞 | NP-40或RIPA(貨號:R0278) |
細胞質(可溶) | Tris-HCl(貨號:T3253) |
細胞質(細胞骨架) | Tris-Triton(貨號:X100) |
細胞膜結合部分 | NP-40(貨號:NP40)或RIPA |
細胞核 | RIPA或核裂解液 |
線粒體 | RIPA或線粒體分離試劑 |