Wyatt公司此次推出的Mobius mobility系統采用了多個ZL技術(正在申請中),以實現對大分子電泳遷移率的快速和可靠測量。
除了能夠快速測量大顆粒物(如脂質體和VLPs)的遷移率外,Wyatt 公司推出的這款Mobius被認為是唯一一款基于激光原理的儀器,可實現重復測量復雜蛋白的電泳遷移率,如抗體制劑、牛血清白蛋白和溶菌酶。這項新產品旨在解決蛋白質遷移率的獨特測量,而不是單純為了測量粒子而對儀器進行的改進。
電荷是所有大分子的基本屬性。在膠體懸浮液中,電荷數量以及粒子和媒介界面上的篩選是決定懸浮液穩定性的關鍵。許多生物大分子如蛋白質,靜電相互作用也可以對他們的構象和功能產生巨大的影響。由于很少能夠直接測量到界面電勢,所以電泳遷移率現已被廣泛認為是分子電荷的性能。
激光散射不僅是一種無創性方法,更難能可貴的是它能夠對大分子的電泳遷移率進行物理基本原理測量。然而,當涉及到蛋白質時,由于其小顆粒尺寸(<5 nm)和明顯的布朗運動,使得很難檢測到令人滿意的結果。
通過長期的測量,得出移動掩蔽擴散的平均值,以顯示大分子電泳。在這個過程中,這些脆弱的分子遭受電流侵襲,往往發生不可逆轉的損壞、退化,致使結果不準確。由于溶液電離度的增加,局勢更加惡化,原因是需要更多的電流來促使衡量的電泳。能夠成功測量蛋白質遷移率的關鍵問題在于縮短測量時間以及關于分子擴散平均距離的可靠性數據。
Wyatt Technology推出的Mobius系統可以達到上述的要求,該設備通過進行大量的平行試驗,并將分子的大小范圍擴展到2nm以下。縮短的測量時間(在大多數情況下<60秒),有助于保存一些珍貴或易破碎的蛋白質樣品。舉例來說,當使用體積排阻色譜(SEC)法檢測單克隆抗體時,通過Mobius系統對樣品的遷移率進行測量后,該單克隆抗體依然保存完整。樣品回收率大于98%。
Wyatt Technolog公司的Mobius還具備另一大優勢,該技術也正在申請ZL,通過該ZL技術可以大大提高檢測靈敏度:2 mg/mL溶菌酶或0.5 mg/mLBSA。
使用WyattQELS配件可同時測量大分子的流體力學半徑,這是利用反向散射光來確定樣本的平移擴散系數。進樣可以采用人工注射、自動取樣器、注射泵或自動滴定器。Mobius還具有溫度控制能力,能夠進行自動溫度分析。
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