1. 實驗原理
當紅細胞通過計數孔計數時,其體積的大小與之產生的脈沖的大小成正比,血球壓積正是基于此原理測出的,血球壓積以百分比表示,可由一公式算出,即紅細胞總體積或累積容積與1:50000稀釋全血體積的比較,其公式如下:
HCT=(樣本中RBC體積/樣本體積)×100
2. 標本采集:
2.1 標本種類:新抽取的凝血或手指末梢血
2.2 標本要求:
2.2.1 抗凝劑采用EDTA K2抗凝
2.2.2 用手指末梢血作白細胞檢驗時,最少樣品量為200ul,如手指有凍瘡,則主張采用耳垂血。
3.
標本儲存:2小時內完成檢驗,室溫放置下不超過8小時,4-8℃保存不超過48小時。
4. 標本運輸:室溫運輸
5. 標本拒收標準:污染,凝固標本不能作測定
6. 試劑
6.1試劑名稱:sysmex血細胞分析試劑
6.2 生產廠家:希森美康株式會社
6.3 試劑組成
試劑1:嗜堿細胞溶血素
試劑2:嗜堿細胞溶血素
試劑3:白細胞分類染液
試劑4:稀釋液
6.4 試劑儲存條件及有效期:儲存溫度為5-30℃,有效期為一年,開封后的使用期限為60天。
7. 儀器設備
7.1 儀器名稱:sysmex血細胞分析儀
7.2 儀器廠家:日本sysmex株式會社
7.3 儀器型號:XT-2000i
8. 操作步驟
8.1 手工模式:
8.1.1
上下顛倒試管將內容物充分混勻。
8.1.2 輕輕取下蓋子,防止血液濺出。
8.1.3 將試管正確放入手工吸引管,吸引管浸入樣品。
8.1.4 按start鍵,樣品開始吸取。
8.1.5 當ready led 暗(并發出兩聲短音)移開試管。
8.1.6 當ready led再次亮起時,準備下一個樣品,重復上述步驟。
8.2 進樣器模式:
8.2.1 將試管入試管架,將試管架放在進樣器的右側
槽中,最多能入5個試管架。
8.2.2 單擊sampler start鍵
9. 結果的分析與判斷:在儀器顯示屏上將顯示結果
10. 質量控制
10.1 三種質量控制品(高、中、低),分別對應三種靶值,做出來的質控品不能超出質控靶值的上下限范圍,否則實驗無效。
10.2 計算方法
當結果出現差異時用下列方法校正
Coll= (Xct/Zct)×Col2
式中: Coll—新質控調整系數
Col2—原質控調整系數
Xct —質控品靶值
Zct —質控品測得值
11. 參考值范圍:紅細胞比積(Ht)檢驗:參考值:男性0.42~0.49(42%~49%),女性0.37~0.43和新生兒0.49~0.54。
12. 臨床意義:失水和大面積燒傷等所致的血液濃縮以及真性紅細胞增多癥時增高。貧血及血液稀釋時下降。
13. 當檢驗系統(儀器)不能工作時,所采取的補救措施:當檢驗系統(儀器)不能工作時,可聯系廠家,進行緊急修理,如一時不能修好,如別的實驗室有同類儀器,可到別的儀器先檢驗,如別的實驗室無同類儀器,申請廠家送一臺正常的代替。
14. 參考文獻
14.1 葉應嫵,王毓三,等,全國臨床檢驗操作規程,第二版,東南大學出版社,1997,169-173
14.2 SySmex F-820中文操作說明書