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  • GSTpulldown操作流程

    利用重組技術將探針蛋白與GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通過GST與固相化在載體上的GTH(Glutathione)親和結合,已廣泛應用于分子生物學(1)證實兩種蛋白可能有相互作用(2)尋找能與已知蛋白發生相互作用的未知蛋白。實驗方法原理利用重組技術將探針蛋白與GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通過GST與固相化在載體上的GTH(Glutathione)親和結合。因此,當與融合蛋白有相互作用的蛋白通過層析柱時或與此固相復合物混合時就可被吸附而分離。GST-pulldown主要包括以下三個部分:①利用基因重組技術構建帶有GST標簽的原核表達載體;②通過原核表達系統表達帶有GST標簽的融合蛋白;③利用GST親和純化柱進行蛋白純化獲得高純度的融合蛋白,再利用GST親和純化柱進行蛋白間的相互作用檢測。實驗材料探針蛋白原核蛋白細胞蛋白組織蛋白提取物試劑、試劑......閱讀全文

    GSTpulldown操作流程

    實驗目的:體外檢測蛋白質與蛋白質之間相互作用。用于驗證兩個已知蛋白的相互作用,或者篩選與已知蛋白相互作用的未知蛋白。實驗原理:利用重組技術將探針蛋白與GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通過GST與固相化在載體上的GTH(Glutathione)親和結合。因此,

    GSTpulldown操作流程

    實驗目的:體外檢測蛋白質與蛋白質之間相互作用。用于驗證兩個已知蛋白的相互作用,或者篩選與已知蛋白相互作用的未知蛋白。實驗原理:利用重組技術將探針蛋白與GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通過GST與固相化在載體上的GTH(Glutathione)親和結合。因此,

    GSTpulldown操作流程

    實驗目的:體外檢測蛋白質與蛋白質之間相互作用。用于驗證兩個已知蛋白的相互作用,或者篩選與已知蛋白相互作用的未知蛋白。?實驗原理:利用重組技術將探針蛋白與GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通過GST與固相化在載體上的GTH(Glutathione)親和結合。

    GSTpulldown操作流程

    實驗材料 探針蛋白原核蛋白細胞蛋白組織蛋白提取物試劑、試劑盒 NaClKClNa2HPO4KH2PO4Triton-100IPTGPMSF(苯甲基磺酰氟)CocktaierImmobilized Glutathione無水乙醇儀器、耗材 定容瓶錐形瓶高速離心機低溫冰箱超聲儀EP管層析柜

    GSTpulldown操作流程

      實驗目的:體外檢測蛋白質與蛋白質之間相互作用。用于驗證兩個已知蛋白的相互作用,或者篩選與已知蛋白相互作用的未知蛋白。   實驗原理:利用重組技術將探針蛋白與GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通過GST與固相化在載體上的GTH(Glutathione)

    GSTpulldown操作流程

    實驗概要體外檢測蛋白質與蛋白質之間相互作用。用于驗證兩個已知蛋白的相互作用,或者篩選與已知蛋白相互作用的未知蛋白。實驗原理利用重組技術將探針蛋白與GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通過GST與固相化在載體上的GTH(Glutathione)親和結合。因此,當與

    GSTpulldown操作流程

    利用重組技術將探針蛋白與GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通過GST與固相化在載體上的GTH(Glutathione)親和結合,已廣泛應用于分子生物學(1)證實兩種蛋白可能有相互作用(2)尋找能與已知蛋白發生相互作用的未知蛋白。實驗方法原理利用重組技術將探針蛋

    移液器的操作流程

    移液器的使用方法:1調節量程在調節量程時,如果要從大體積調為小體積,則按照正常的調節方法,逆時針旋轉旋鈕即可;但如果要從小體積調為大體積時,則可先順時針旋轉刻度旋鈕至超過量程的刻度,再回調至設定體積,這樣可以保證量取的最高精確度。在該過程中,千萬不要將按鈕旋出量程,否則會卡住內部機械裝置而損壞了移液

    移液器的操作流程

    1調節量程在調節量程時,如果要從大體積調為小體積,則按照正常的調節方法,逆時針旋轉旋鈕即可;但如果要從小體積調為大體積時,則可先順時針旋轉刻度旋鈕至超過量程的刻度,再回調至設定體積,這樣可以保證量取的高確度。在該過程中,千萬不要將按鈕旋出量程,否則會卡住內部機械裝置而損壞了移液槍。 2裝配槍頭(吸液

    臨床輸血操作流程

    1 一般病人用血 (1)當班護士協助醫師向病人解釋,做好輸血前的“九項”①檢查工作;(2)將血交叉申請單與貼好標簽的試管攜至病人床邊核對“4項”②內容后,采血標本5~6ml;(3)將“4單”③及血標本一起送到血庫與血庫人員核對、雙簽名;(4)交叉配血完成后,由當班護士與血庫人員共同核對“九項”、雙簽

    熔點儀操作流程

    熔點儀操作流程1、裝樣1、將樣品置于瓷研缽內,輕輕研碎成盡可能細密的粉末,以得到均一的樣品。2、取一支或數支清潔、干燥的熔點管,將其開口端插入樣品中,裝入樣品。3、取一長約0.8米的干燥玻璃管,直立于玻璃板上,將裝有試樣的熔點管在其中投落至少20次,使熔點管內樣品緊縮至3-4mm高。如果同時測兩個樣

    ELISpot實驗操作流程

    ELISPOT全名為酶聯免疫斑點檢測,英文:Enzyme-linked Immunospot Assay。它結合了細胞培養技術與酶聯免疫吸附技術(即ELISA技術),能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。其技術原理,一句話概括就是:用抗體捕獲培養中的細胞分泌的細胞因子,并以酶聯斑點顯色的方式將其表

    細胞復蘇操作流程

    細胞復蘇操作流程:1、將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。2、將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內完全解凍

    真空烘箱操作流程

      1、將物料均勻放入真空干燥箱內樣品架上,推入干燥箱內;  2、關緊箱門,放氣閥,箱門上有螺栓,可使箱門與硅膠密封條緊密結合;  3、將真空泵與真空閥連接,開啟真空閥,抽真空;  4、依據真空泵的性能,抽到壓力表為真空泵的極限值為準;  5、抽完真空后,先將真空閥門關閉,如果真空閥門關不緊,請更換

    離子色譜操作流程

    一、配制新鮮的淋洗液 按照色譜柱配制與之相適宜濃度的淋洗液,配制淋洗液的去離子水要經過脫氣處理, 如果氣泡進入泵內會影響泵的穩定,基線打折,如果氣泡進入檢測器會影響樣品的測定。二、開機順序 先開主機后開泵,然后打開工作站,點控制面板連接。三、啟動泵 首先確保濾頭到泵之間的輸液管充滿淋洗液不能有氣體,

    實驗電爐操作流程

    1. 本儀器額定功率為12千瓦,高可控溫度為1000度,升溫速率必須小于120度/分鐘(否則功率過大,影響儀器正常使用)。 ?2. 箱式電阻爐配套使用的電爐溫度控制器可直接調控箱式電阻爐的電源開關、溫度控制等測量參數。打開綠色電源開關【ON】,開關變綠,儀器右邊的儀表盤上的【指示】燈亮,通過左右撥動

    生物安全柜操作操作流程

    操作流程:生物安全柜玻璃門為手動操作,正常工作時玻璃門的開啟高度200mm,如果超出表示高度時,聲光報警系統啟動,提醒用戶玻璃門超高。注:當玻璃門開啟時,紫外燈無法開啟。生物安全柜電源為220V、50Hz,柜體后部方有接地標志,必須做到可靠接地后方可使用。接通電源后,通電進入待命狀態。(1)按下[紫

    為什么要做gstpulldown實驗

    因為此方法簡單易行,操作方便。GST pull-down實驗是一個行之有效的驗證酵母雙雜交系統的體外試驗技術,近年來越來越受到廣大學者的青睞。其基本原理是將靶蛋白-GST(Glutathione-S-transferase谷胱苷肽巰基轉移酶)融合蛋白親和固化在谷胱甘肽親和樹脂上,作為與目的蛋白親和的

    電子分析天平操作流程及程序流程

      1.手柄在啟動和關閉時,務必緩慢均勻地旋轉和關閉。過快會導致刀刃緊急接觸和受損。同時,由于過度晃動,會導致測量誤差。  2.稱重時,應適當估計添加砝碼,隨后啟動電子分析天平,按指針偏移方向增加砝碼。投影屏幕上的讀數應靜止到10毫克以內。  3.在每次稱量時,都應將電子分析天平關閉,不能在電子分析

    模溫機額的操作流程

      一、啟動前的檢查  1、周圍是否清潔無雜物,檢查電源、加熱器、控制器、壓力表、泵浦等是否正常.  2、檢查膨脹油箱油位是否在1/2-3/5 液位以上位置,液位感應器等是否正常.  3、接通控制柜電源,檢查電壓是否正常,檢查指示燈及各顯示儀表是否正常.  二、啟動  1、啟動導熱油循環泵,啟泵后正

    反向PCR的操作流程

    擴增前先用限制性內切酶酶切樣品DNA,然后用DNA連接酶連接成一個環狀分子,通過反向PCR擴增引物的上游片段和下游片段。

    暗室實驗的操作流程

    1.新鮮配制1-2ml工作液(A液與B液1:1或1:40混合配制)2. 進入暗室,在黑暗的條件下,加入1μl未稀釋的二抗(HRP連接物)3. 混合后,可立即在暗室中觀察到藍色光

    移液器的操作使用流程

    移液器的使用選擇量程合適的移液器:移液器只能在特定量程范圍內準確移取液體,如超出zui低或zui大量程,會損壞移液器并導致計量不準;設定容量值?粗調:通過調節旋鈕將容量值迅速調整至接近自己的預想值;細調,當容量值接近設定值以后,應將移液器刻度顯示窗平行放至自己的眼前,通過調節旋鈕慢慢地將容量值調至預

    烘箱的使用操作流程

    烘箱外殼通常選用薄鋼板制作,外表烤漆,工作室選用優異的構造鋼板制作。外殼與工作室之間填充硅酸鋁纖維。加熱器裝置底部,也可安頓頂部或兩邊。溫度操控儀表選用數顯智能表,PID調節:裝備999.99小時時刻操控器并與報警裝置相連接。使烘箱的操作更簡潔,方便與有效。烘箱的使用操作流程:1.?使用前必需留心所

    洗板機的操作流程

      1.打開電源,啟動洗板機,待自動停止后,視屏顯示[Run]:A,-+,洗板機啟動運行Other yes.  2.按Other鍵,視屏出現Prime:Ch1即第一通道(蒸餾水清洗通道),通過-+鍵可調節Ch1和Ch2(洗滌液通道),CH1按yes鍵洗板機自動用蒸餾水清洗洗滌通道。Ch2,按yes鍵

    箱式實驗電爐操作流程

    1. 本儀器額定功率為12千瓦,高可控溫度為1000度,升溫速率必須小于120度/分鐘(否則功率過大,影響儀器正常使用)。 ?2. 箱式電阻爐配套使用的電爐溫度控制器可直接調控箱式電阻爐的電源開關、溫度控制等測量參數。打開綠色電源開關【ON】,開關變綠,儀器右邊的儀表盤上的【指示】燈亮,通過左右撥動

    干燥烘箱的操作流程

    安全標準作業程序設備名稱:烘箱作業方式:個人作業處理物品:玻璃容器使用器具:無防護器具:護目鏡、絕緣手套、實驗衣工作步驟:1.工作前:(1)檢查電氣是否異常(2)將玻璃容器放置烘乾箱內(3)開啟電源開關并調整適當溫度與加熱時間。2.工作中:(1)專心操作并配戴防護器具。(2)操作人員嚴禁離開加工區。

    WesternBlot操作流程

    試劑配制(一)母液1.0mol/L Tris·HCl Tris (MW121.14) 30.29g蒸餾水 200ml溶解后,用濃鹽酸調pH至所需點(見下所示),最后用蒸餾水定容至250ml,高溫滅菌后室溫下保存。 PH HCl7.4 約17ml7.5 約16m7.6 約15ml8.0 約10ml1.

    快速消解的操作流程

      1.打開消解器,預熱到165℃。溫度和程序設置與選擇參見儀器程序更新。?  2. 擰開兩支COD快速消解預制管試劑的蓋子。 ?確認使用的是合適量程的試劑。?  3. 樣品準備: 將一支預制管試劑拿住并保持在45°,用移液管或移液槍移取2.00 mL水樣到預制管中。?  4. 空白樣準備: 將另一

    藥敏試驗的操作流程

    (1)培養基的厚度對抑菌圈的大小有影響,故平皿中加入培養基要固定,以4mm深度為宜。制備的平板使用時應放于35℃溫箱中30min去除過多的水分,以免影響抗菌藥物的擴散。(2)接種細菌后應在室溫放置片刻,待菌液被培養基吸收后,再貼紙片;但不宜放置太久,否則在貼紙片前細菌已開始生長可使抑菌圈縮小。(3)

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