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  • 細胞生物基本方法:肌組織細胞培養

    肌組織細胞培養1)骨骼肌細胞培養1.殺死動物,無菌取大腿肌組織,切成0.3~0.5厘米小塊。2.用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,無菌紗網或紗布濾過,合成培養基加10%小牛血清培養,為促進分化可加1%的胎汁。3.細胞接種量為2×106/皿,接種在膠原或明膠的底物上能促進細胞分化。明膠制備比較簡單,常用Hanks液配的0.01%明膠。 2) 肌細胞培養1.選新鮮受精雞卵,置溫箱中孵育(溫箱中放有水槽,以維持箱內溫度),每日翻動一次(180度),孵育9~12天。2.取雞胎法相間《組織培養和分子細胞學技術》53頁。3.用眼科剪剪開胸腔,剝出心臟,置入皿中用Hanks液漂洗1~2次。4.小心剪除大的動靜脈,保留心室肌,用組織塊或消化培養法均可。......閱讀全文

    細胞培養的基本條

    細胞培養是指從體內組織取出細胞在體外模擬體內環境下,使其生長繁殖,并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物可以是單個細胞,也可以是細胞群。以下是細胞培養的基本條件:?一、合適的細胞培養基?合適的細胞培養基是體外細胞生長增殖的重要的條件之一,培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質

    細胞培養的基本技術

    一、清洗新采用和重新使用的培養器皿,都要嚴格清洗,以防各種有害物質對培養細胞損害。培養用的塑料器皿目前主要依靠進口,均已無菌密封包裝,可直接使用。對于塑料瓶蓋或膠塞等,可水中浸泡后用2%NaOH煮沸10~20min,自來水中浸泡和蒸餾水漂洗2~3次,晾干備用。細胞培養中的絕大部分器皿系玻璃制品,清洗

    組織源性原代細胞培養實驗室組建的基本要求

    一、實驗室設計1、細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。2、細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。3、細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側,常規操作和封閉培養于一室,為

    腫瘤組織源性的原代細胞培養

    一、腫瘤細胞培養的概述????????腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用腫瘤原代細胞培養基礎培養基、5~10%血清濃度、細胞培養添加劑、抗生素等等即可。或在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物,或原患者血清(1~2%)以利細胞生長。用細胞生長因子如胰島素、氫化可的松、

    組織細胞培養的要點有哪些?

      組織培養技術是在人為創造的無菌條件下將生物的離體器官(如根、莖、葉、莖段、原生質體)、組織或細胞置于培養基內,并放在適宜的環境中,進行連續培養以獲得細胞、組織或個體的技術。這種技術已廣泛應用于農業和生物、醫藥的研究。  體內組織細胞在體外培養時,所需培養環境基本相似,但由于物種、個體遺傳背 景及

    細胞培養基本概念和細胞培養的環境

    一、細胞培養基本概念細胞培養是指從體內組織取出細胞摹擬體內出現環境,在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養條件下,使期生長繁殖,并維持其結構和功能的一種培養技術。 細胞培養 的培養物為單個細胞或細胞群。在醫學遺傳學研究中應用最廣泛的是外周血淋巴細胞、皮膚或纖維細胞和各種能在體外長期生長的細胞系。外周血淋

    常規細胞培養方法

    原理?1? 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養。???儀器、材料及試劑?儀器:培養箱(調整至37℃),培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗

    細胞培養常規方法

    . 凍存細胞的復蘇應遵守慢凍快融的原則。先將水浴鍋調至37-37。5度,取出凍存的細胞迅速放入后將細胞面浸至水面以下不斷搖動至融化。在無菌臺內將完全培養基加入50ml的小培養瓶內,約5ml左右,然后用無菌吸管從凍存管內取出細胞,置培養并內輕輕搖晃,使細胞均勻后置培養箱內培養。2. 傳代:對于貼壁細胞

    ATCC細胞培養方法

    基本原理?通過在支持物(如蓋玻片)上培養貼壁細胞,可以應用抗體檢測細胞表面抗原的表達或進行酶細胞化學以及免疫細胞化學檢測。該方法的優點是細胞貼壁牢固,能夠維持細胞生長時的狀態。?試劑和設備?細胞懸浮液;?6孔平底組織培養板,或φ60 mm培養皿;?18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于

    ATCC細胞培養方法

    基本原理?通過在支持物(如蓋玻片)上培養貼壁細胞,可以應用抗體檢測細胞表面抗原的表達或進行酶細胞化學以及免疫細胞化學檢測。該方法的優點是細胞貼壁牢固,能夠維持細胞生長時的狀態。?試劑和設備?細胞懸浮液;?6孔平底組織培養板,或φ60 mm培養皿;?18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于

    腫瘤細胞培養方法

    腫瘤細胞培養成功關鍵在于:取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面,腫瘤細胞培養與正常組織細胞培養并無原則差別,初代培養應用組織塊和消化培養法均可。1、取材:人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要,體積較大的腫瘤組織中有退變或壞死區,取材時盡量避

    病理學的研究方法之組織培養與細胞培養

      將某種組織或單細胞用適宜的培養基在體外加以培養,以觀察細胞、組織病變的發生發展、如腫瘤的生長、細胞的癌變、病毒的復制、染色體的變異等等。此外,也可以對其施加諸如射線、藥物等外來因子,以觀察其對細胞、組織的影響等。這種方法的優點是,可以較方便地在體外觀察研究各種疾病或病變過程,研究加以影響的方法,

    關于細胞培養生物反應器的基本介紹

      細胞培養生物反應器主要用于動植物細胞培養、微載體培養、轉基因制藥工程等。目前生命科學及生物制藥領域應用較多。上海楚怡的QC系列細胞培養生物反應器主要有三種即:貼壁細胞培養、懸浮細胞培養和微載體培養,根據自己實驗需要可以選擇不同的規格,其中2L/5L/7.5L/15L 多為硅硼玻璃材質,主要用在實

    光照培養箱廣泛適用于微生物組織細胞培養

    用途概述:? ?光照培養箱,采用品環保無氟制冷壓縮機和的微電腦可編程控器。? ? ? 廣泛適用于微生物組織細胞培養、種子發芽、育苗試驗、植物栽培以及昆蟲、小動物等,與其他用途的恒溫光照實驗等。產品點:1.微電腦智能控制溫度,光照控制穩定、準確、可靠,可設定多段程序,每段設置時間范圍1-99小時。2.

    細胞生物基本方法:特殊培養法

    特殊培養法1)二倍體細胞培養法二倍體細胞培養法與一般培養相同,關鍵在于傳代,其傳代程序為:1.??????吸除舊培養液注入另瓶中。2.??????用溫BSS沖洗1次。3.??????用0.25%溫胰蛋白酶消化,加入消化液量以僅覆蓋細胞層即可;作用1~5分鐘。4.??????待細胞附著松動、細胞質邊緣

    細胞培養基本知識

    一.細胞培育的基本概念體外培育(in vitro culture)包含一切構造層次的培育,即:安排培育(tissue culture)、細胞培育(cell culture)和器官培育(organ culture)。細胞培育(Cell culture)指從生物機體取出有些安排渙散成單個細胞或直接從機體

    動物細胞培養——基本練習

    實驗方法原理這部分是一名實習生或學生應當首先接觸的內容。大部分是簡單易懂并易于操作的,為了使實驗比較有趣,操作方案和備選方案以相互參考的方式詳細列出。每一個操作方案中材料部分的指定數量見操作說明,但可以按比例調節。表2.1中黑體部分的練習是必需的。首先有必要參觀介紹組織培養的設施,這可以使實習生.見

    單細胞培養的基本介紹

      單細胞培養(single cell culture)是指從植物器官、愈傷組織或懸浮培養物中游離出單個細胞,在無菌條件下,進行體外生長、發育的技術。人們分離和培養植物單細胞的設想和實踐都比較早,但成功地進行單細胞培養是隨著更有效的培養基的發展以及從愈傷組織懸浮培養物分離單細胞的專門技術的建立才實現

    初代細胞培養實驗——組織塊培養法

    實驗材料組織試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶NaHCO3儀器、耗材吸管培養瓶燒杯眼科剪眼科鑷實驗步驟1. ?剪切把組織小塊(1cm3)置入小燒杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污,吸凈Hanks液,用眼科剪反復剪切成1mm3塊為止;2. ?擺布用彎頭吸管吸取若干小塊,置入培養

    組織源性正常小鼠原代真皮纖維原細胞培養實驗方法

    一、實驗試劑1、培養基: Primary Cell Medium + 10% FBS + 1% P/S + Primary Cell Supplement2、凍存液: Primary Cell Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗滌液: 1 × PBS (pH 7.4 )+

    組織源性正常大鼠原代心肌細胞培養實驗方法

    一、實驗試劑1、培養基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、凍存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗滌液: 1×PBS(pH 7.4)+ 1% P/S4、染色液: 0.4

    細胞生物基本方法:微生物污染的排除

    微生物污染的排除細胞受各種霉菌、細菌和支原體污染后,一般都較難排除或殺滅,其中以支原體更難排除,因此從預防著眼為上。?1)??抗生素除菌法:用BM-1(截耳素衍生物)和BM-2(四環素衍生物)抑制支原體1.抗生素制備:均可用PBS配成250×濃縮液-20℃備用,使用濃度參考《組織培養和分子細胞學技術

    神經膠質細胞培養方法

    神經細胞(神經元)不易培養,只有在適宜情況下,如接種在膠原底層上,或加入神經生長因子和膠質細胞因子時,可出現一定程度的分化,長出突起等現象,但很難使之增殖。而神經膠質細胞是神經組織中比較容易培養的成分。人、鼠等腦組織即可用于神經膠質細胞培養,不僅能獲得生長的膠質細胞,也可形成能傳代的二倍體細胞系。一

    神經膠質細胞培養方法

    神經細胞(神經元)不易培養,只有在適宜情況下,如接種在膠原底層上,或加入神經生長因子和膠質細胞因子時,可出現一定程度的分化,長出突起等現象,但很難使之增殖。而神經膠質細胞是神經組織中比較容易培養的成分。人、鼠等腦組織即可用于神經膠質細胞培養,不僅能獲得生長的膠質細胞,也可形成能傳代的二倍體細胞系。一

    細胞培養概念和方法

    細胞培養(英語:cell culture)是一種現代生物學技術,是將真核生物或原核生物細胞培養在受控制的狀態下,使其生長。這項技術的發展與方法,與組織培養或器官培養關系密切。細胞培養的例行步驟包括解凍細胞、換盤、分盤、換細胞培養液、結凍細胞等步驟。細胞培養分為兩大類:貼壁培養(adherent cu

    動物細胞培養方法

    體外培養的動物細胞可分為原代細胞與傳代細胞。原代細胞是指從機體取出后立即培養的細胞,進行傳代培養后的細胞即稱為傳代細胞。?任何動物細胞的培養均需從原代細胞培養開始。動物很多組織的細胞,如幼年動物的腎、肺、卵巢、精巢、肌肉及腫瘤等組織的細胞較易培養,而神經細胞等則較難培養。原代細胞培養步驟如下:首先取

    微生物細胞培養的簡介

      微生物多為單細胞生物,野生生存條件比較簡單。所以微生物人工培養的條件比動植物細胞簡單得多。其中厭氧微生物培養比好氧微生物復雜,因為嚴格厭氧需要維持二氧化碳等非氧的惰性氣體濃度,而好氧微生物則只需要通過不斷攪拌提供無菌氧氣。微生物對培養條件要求不如動植物細胞那樣苛刻,玉米漿、蛋白胨、麥芽汁、酵母膏

    微生物細胞培養的要求

    微生物細胞培養微生物多為單細胞生物,野生生存條件比較簡單。所以微生物人工培養的條件比動植物細胞簡單得多。其中厭氧微生物培養比好氧微生物復雜,因為嚴格厭氧需要維持二氧化碳等非氧的惰性氣體濃度,而好氧微生物則只需要通過不斷攪拌提供無菌氧氣。微生物對培養條件要求不如動植物細胞那樣苛刻,玉米漿、蛋白胨、麥芽

    細胞培養細胞凍存的基本概念

    細胞凍存是將細胞放在低溫環境,減少細胞代謝,以便長期儲存的一種技術。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一,起到了細胞保種的作用

    細胞培養的基本內容介紹

      細胞培養(cell culture)是指在體外模擬體內環境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對于整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,細胞培養都是一個必不可

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