實時熒光 RT-PCR 方法檢測新型冠狀病毒核酸
（一）目的。
規范實時熒光RT-PCR方法檢測新型冠狀病毒核酸的工作程序，保證實驗結果的正確可靠。
（二）范圍。 copyright sysqy.com
適用于實時熒光RT-PCR方法檢測新型冠狀病毒核酸。
（三）職責。 內容來自實驗室前沿網站
檢測人員：負責按照本檢測細則對被檢樣本進行檢測。 sysqy.com
復核人員：負責對檢測操作是否規范以及檢測結果是否準確進行復核。
部門負責人：負責對科室綜合管理和檢測報告的審核。
（四）樣本接收和準備。
核對被檢樣本姓名、性別、年齡、編號及檢測項目等；
待檢樣本的狀態如有異常，需注明；
待檢樣本應存放于-70℃冰箱保存。
（五）檢測項目。
1.新型冠狀病毒核酸測定（實時熒光RT-PCR方法） 推薦選用針對新型冠狀病毒的ORF1ab、N基因區域的引物和探針。
靶標一（ORF1ab）: copyright sysqy.com
正向引物（F）：
CCCTGTGGGTTTTACACTTAA 反向引物（R）：
ACGATTGTGCATCAGCTGA
熒光探針（P）：
5'-FAM-CCGTCTGCGGTATGTGGAAAGGTTATGG-BHQ1-3'
靶標二（N）:
正向引物（F）：
GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT 反向引物（R）： 內容來自實驗室前沿網站
CAGACATTTTGCTCTCAAGCTG
熒光探針（P）：
5'-FAM-TTGCTGCTGCTTGACAGATT-TAMRA-3'
核酸提取和實時熒光RT-PCR反應體系及反應條件參考相關廠家試劑盒說明。
2.結果判斷 陰性:無Ct值或Ct≥40。
陽性：Ct值<37，可報告為陽性。
灰度區：Ct值在37-40之間，建議重復實驗，若重做結果Ct
值<40，擴增曲線有明顯起峰，該樣本判斷為陽性,否則為陰性。 內容來自實驗室前沿網站
注：如果用的是商品化試劑盒，則以廠家提供的說明書為準。