PCR污染的防止方法
(一)合理分隔實驗室:將樣品的處理、配制PCR反應液、PCR循環擴增及PCR產物的鑒定等步驟分區或分室進行,特別注意樣本處理及PCR產物的鑒定應與其它步驟嚴格分開。最好能劃分①標本處理區;②PCR反應液制備區;③PCR循環擴增區;④PCR產物鑒定區。其實驗用品及吸樣槍應專用,實驗前應將實驗室用紫外線消毒以破壞殘留的DNA或RNA。 (二)吸樣槍:吸樣槍污染是一個值得注意的問題。由于操作時不慎將樣品或模板核酸吸入槍內或粘上槍頭是一個嚴重的污染源,因而加樣或吸取模板核酸時要十分小心,吸樣要慢,吸樣時盡量一次性完成,忌多次抽吸,以免交叉污染或產生氣溶膠污染。(三)預混和分裝PCR試劑:所有的PCR試劑都應小量分裝,如有可能,PCR反應液應預先配制好,然后小量分裝,-20℃保存。以減少重復加樣次數,避免污染機會。另外,PCR試劑,PCR反應液應與樣品及PCR產物分開保存,不應放于同一冰盒或同一冰箱。(......閱讀全文
PCR污染的防止方法
(一)合理分隔實驗室:將樣品的處理、配制PCR反應液、PCR循環擴增及PCR產物的鑒定等步驟分區或分室進行,特別注意樣本處理及PCR產物的鑒定應與其它步驟嚴格分開。最好能劃分①標本處理區;②PCR反應液制備區;③PCR循環擴增區;④PCR產物鑒定區。其實驗用品及吸樣槍應專用,實驗前應將實驗室用紫外線
PCR污染及防止污染的方法
污染原因 (一)標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散,導致彼此間的污染。 (二)PCR試劑的污染:主
怎么防止PCR實驗室污染
PCR實驗室污染標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散,導致彼此間的污染。PCR試劑的污染:主要是由于
防止RNA酶污染方法
防止RNA酶污染的措施1. 所有的玻璃器皿均應在使用前于180℃的高溫下干烤6hr或更長時間。2. 塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或用氯仿沖洗(注意:有機玻璃器具因可被氯仿腐蝕,故不能使用)。3. 有機玻璃的電泳槽等,可先用去污劑洗滌,雙蒸水沖洗,乙醇干燥,再浸泡在3% H2O2 室溫10mi
高GC含量PCR樣本的擴增困難與防止污染與降解的操作方法
? ? ? ?每天做實驗小心翼翼,時時擔心提取的DNA被污染、被降解。終于,廢了九牛二虎之力,好不容易提取到高質量的DNA,然而PCR仍然P不出來條帶。是試劑加漏了嗎?是酶失活了嗎?換上新試劑,冰上重來一次,然并卵,不僅P不出來,更重要的是也不知道為啥P不出來,貝多芬都彈不出我的悲傷!?? ?
PCR污染的監測方法
1.陽性對照:在建立PCR反應實驗室及一般的檢驗單位都應設有PCR陽性對照,它是PCR反應是否成功、產物條帶位置及大小是否合乎理論要求的一個重要的參考標志。陽性對照要選擇擴增度中等、重復性好,經各種鑒定是該產物的標本,如以重組質粒為陽性對照,其含量宜低不宜高(100個拷貝以下),但陽性對照尤其是重組
如何使用KeyPro污染凈化儀防止RNA的降解和保證PCR的結果...
如何使用KeyPro污染凈化儀防止RNA的降解和保證PCR的結果準確性在此次的新型冠狀病毒疫情中,核酸檢測作為確診的金標準發揮著重要的作用。眾所周知,本次新冠病毒的核酸檢測流程為采樣(咽拭子、肺泡灌洗液),提取病毒RNA,再經過RT-qPCR或者一步法RT-數字PCR檢測樣本。但近期關于核酸檢測準確
防止RNA酶污染的措施
在所有RNA實驗中,最關鍵的因素是分離得到全長的RNA。而實驗失敗的主要原因是核糖核酸酶(RNA酶)的污染。由于RNA酶廣泛存在而穩定,一般反應不需要輔助因子。因而RNA制劑中只要存在少量的RNA酶就會引起RNA在制備與分析過程中的降解,而所制備的RNA的純度和完整性又可直接影響RNA分析的結果,所
如何防止RNA酶污染
在所有RNA實驗中,最關鍵的因素是分離得到全長的RNA。而實驗失敗的主要原因是核糖核酸酶(RNA酶)的污染。由于RNA酶廣泛存在而穩定,一般反應不需要輔助因子。因而RNA制劑中只要存在少量的RNA酶就會引起RNA在制備與分析過程中的降解,而所制備的RNA的純度和完整性又可直接影響RNA分析的結果,所
氣相色譜柱的應用中防止污染的有效方法
在我們氣相色譜使用中,經常會發現由于直接進樣導致柱子經常性的污染,致使出峰變形,分離效果變差的許多問題:在此我介紹一個比較使用的防止方法:先去買一個柱與柱相互連接的接頭(0.25 n0.32 0.53等均通用),這個你們可以到Agilent售后公司買,(如果你們有需要我可以提供給你們聯系電話!首先聲
培養基防止污染的辦法
確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、真菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中,可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養,48小時即可觀察有
解決PCR實驗室污染的方法
(1)開窗通風:如在短時間內要消除實驗室污染,開窗通風促進實驗室內空氣流通,使停留在室內的核酸排放到室外。? ? (2)紫外燈照射:將實驗室內好生物安全柜內物品平鋪,打開離心機內蓋,然后將紫外等打開照射12-24小時,通風12小時以上。? ? (3)消毒液降解核酸:及時用1%-2%的次氯酸鈉擦拭操作
防止超純水設備被空氣污染的常見方法
充氮法:即在水箱水面上充入氮氣使箱內維持適當的正壓力,阻止大氣與箱內水面接觸。薄膜袋法:即在在水箱內設置袋狀薄膜覆蓋于水面上,薄膜袋隨水位升降,減少水面與空氣接觸面積。浮頂法:即以密度比水輕的輕質材料在水箱內制成整塊板狀浮頂浮于水面,并用輕質彈性材料(如海綿、發泡塑料等)遮蓋浮頂與箱間的間隙,浮頂隨
無所遁形:防止交叉污染
結構設計較差的設備可能無法實現生產安全性,而導致藥品被污染。 一款新型的衛生型稱重模塊使儲罐稱重裝置在衛生敏感環境中具有更高安全性。了解衛生型稱重模塊的運行方式下載衛生設計考慮事項白皮書?? ?必須對料罐進行精確監控時,稱重模塊是首選測量設備。 這些設備相比流量計等其他測量技術具有更高的精確度,不會
細胞培養污染如何防止
細胞培養防止污染的操作方法:1、準備工作:準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養箱及其他儀器的檢查與調試。2、取材:在無菌環境下從機體取出某種組織細胞(視實驗目的而定),經過一定的處理(如消化分散細胞、分離等)后接入培養器皿中,
PCR儀反應液污染處理方法
PCR儀是一種利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。因而,在PCR儀使用時對于環境要求很高,為了避免實驗未完成前可能出現的任何污染反應液的情況,應該了解關于反應液受到污染時,反應液處理方法: l ?紫外照射法:未加模板
PCR儀反應液污染處理方法
PCR儀是一種利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。因而,在PCR儀使用時對于環境要求很高,為了避免實驗未完成前可能出現的任何污染反應液的情況,應該了解關于反應液受到污染時,反應液處理方法: l ?紫外照射法:未加模板
PCR實驗室的防污染方法
按照實驗室的安全工作制度或安全標準操作程序,所有操作符合《實驗室生物安全通用要求》(GB19489-2008)。1、嚴格執行各區功能劃分:試劑儲存和準備區:貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的準備,以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。標本制備區:核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴
PCR實驗室的污染應急處理方法
1、若核酸樣本溢出:立即用布或紙巾覆蓋,由外圍向中心傾倒10%的次氯酸消毒劑,約30分鐘后,清除污染物品,再用次氯酸消毒劑擦拭,并用75%酒精噴灑,移動紫外車定點照射1小時。2、其他不明情況污染:1、暫停所有實驗操作;2、清理實驗室內所有物品,尋找污染來源;3、加大實驗室的通風;4、對實驗室內所有表
PCR污染的監測
一個正規的實驗室,要時刻注意監測實驗室的污染情況。了解實驗室有無污染,污染原因,污染程度,以便采取有效措施,防止和消除污染。一般通過陰陽性對照檢測污染情況。1、陰性對照:? ? 不將模板DNA或RNA加入到PCR試劑中,進行PCR擴增,對試劑是否污染進行監測。陰性水樣參與核酸提取和擴增監測整個試驗
食品生產企業防止污染措施制度
食品安全是一個重大的公共安全衛生問題,直接關系人們的身體健康,為保護顧客的身體健康,有效控制食品污染,防止食品安全事故的發生,按照食品生產加工通用衛生規范的要求,本公司在原料采購、加工過程中采取必要的控制食品污染的條件和措施。 一、加強食品從業人員的食品安全意識,通過培訓,
組織培養中污染及防止
一、污染的來源1、 植物本身具有:(1)植物病原菌 ?有些作物的病害已被透徹研究,因此在大量繁殖時,可立即檢查出來,但有些則否,造成若有污染時,不知來源為何。(2)和植物有關的菌類 有修植物本身便會和一些菌種共生,或是寄生于植物內部。2、 植物所帶入的污染:內在污染源 許多植物表面或大氣中生存的微生
土壤污染物的主要防止手段
1.科學污水灌溉工業廢水種類繁多,成分復雜,有些工廠排出的廢水可能是無害的,但與其他工廠排出的廢水混合后,就變成有毒的廢水。因此在利用廢水灌溉農田之前,應按照《農田灌溉水質標準》規定的標準進行凈化處理,這樣既利用了污水,又避免了對土壤的污染。2.合理使用農藥合理使用農藥,這不僅可以減少對土壤的污染,
淺談PCR方法中常見的污染問題及對策
淺談RT-PCR實驗方法中常見污染問題及對策 河南出入境檢驗檢疫局技術中心 李軻 反轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)是一種體外核酸擴增技術,它具有特異、敏感、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點,能在幾個小時內完成從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的目的產物供分析研究和檢測鑒定,所以
PCR的污染與對策
?一、污染原因 ?(一)標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于 密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提 取過程中,由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠 或形成氣溶膠而擴散,導致彼此間的污染. (二)P
PCR污染的處理(二)
PCR污染及解決對策?PCR檢測微量感染因子時,一定要注意產物殘留污染的問題。?一.?污染的預防進行PCR操作時,操作人員應該嚴格遵守一些操作規程,最大程度地降低可能出現的PCR污染或杜絕污染的出現。(一)劃分操作區:目前,普通PCR尚不能做到單人單管,實現完全閉管操作,但無論是否能夠達到單人單管,
PCR的污染有哪些?
(1)PCR 反應前污染主要是樣品 DNA 的交叉污染。提取 DNA 使用的儀器上殘留的雜質 DNA 或反應管中殘留的 PCR 產物、PCR 操作者皮膚或頭發等均可引起樣品污染。其中 PCR 產物的污染,也稱殘留污染(carryover),是引起樣品交叉污染的主要因素。明膠、Taq DNA 聚合酶等
PCR污染的處理(一)
前言?一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill?Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase?chain?reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一
PCR污染的處理(三)
(二)反應液污染?可采用下列方法之一處理:1.?DNase?I法:PCR混合液(未加模板和Taq聚合酶)加入0.5U?DNase?I,室溫反應30?min后加熱滅活,然后加入模板和Taq聚合酶進行正常PCR擴增。該方法的優點是不需要知道污染DNA的序列;2.?內切酶法:選擇識別4個堿基的內切酶(如M
防止大氣污染,今年德州這樣干
今年,德州將繼續加大大氣污染防治力度。4月12日,記者從市政府獲悉,德州市《 2018年大氣污染防治工作方案》正式下發,將從燃煤污染治理、重點污染源監管等方面加大力度,并嚴格督導考核,PM2.5、PM10改善幅度連續2個月未達到改善目標的縣(市、區),市政府將約談主要負責人。PM2.5濃度同