轉錄依賴的擴增系統的定義方法
1.概述:轉錄依賴的擴增系統(Transcript-based amplification system,TAS),是Kwen等人于1989年研究報道的,主要用于擴增RNA. 合成A、B引物,引物A的3‘末端與待擴增RNA互補,其5’端有T7RNA多聚酶的啟動子信息.逆轉錄酶以A引物為起點合成cDNA;引物B與此cDNA3‘端互補合成cDNA第二鏈.逆轉錄酶除具有逆轉錄活性外,還有DNA多聚酶的活性及RNaseH的活性.T7RNA多聚酶又以此雙鏈DNA為模板.轉錄出與待擴增RNA一樣的RNA ,這些RNA又可作為下輪反應的模板.T7RNA多聚酶的催化效率很高,一個模板可轉錄10——103個RNA拷貝,因而反應液中待檢RNA的數量以10的指數方式擴增.轉錄依賴的擴增系統的主要特點是擴增效率高,因為其拷 2. TAS RNA貝數呈10的指數方式增加,只需6個循環靶序列的拷貝數就能達到2×10。它的另一個特點是特異性高,由于......閱讀全文
核酸序列擴增法的定義
中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點,將結合位點序列與靶序列相連,然后產生靶分子的RNA拷貝,形成反轉錄和RN
基因擴增的定義和原因
基因擴增(gene amplification)是指某一個特定基因的拷貝數選擇性地增加而其它基因的拷貝數并未按比例增加的過程?[1]??。基因擴增產生的可能原因:1)由錯誤的DNA復制和修復導致的基因復制;2)自私遺傳元件偶然捕獲而導致的DNA重復;3)人工聚合酶鏈式反應(PCR)擴增。
不依賴ρ因子的終止的定義
中文名稱不依賴ρ因子的終止英文名稱ρ-independent termination定 義轉錄復合體不通過ρ因子輔助,即可特異性識別自身合成RNA的富GC發夾區與聚U區相連結構,并從模板DNA解離釋放的過程。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),基因表達與調控(二級學科)
逆轉錄PCR的定義
逆轉錄PCR(reverse transcription PCR)或者稱反轉錄PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶鏈式反應(PCR)的一種廣泛應用的變形。在RT-PCR中,一條RNA鏈被逆轉錄成為互補DNA,再以此為模板通過PCR進行DNA擴增。
轉錄物組學的定義
中文名稱轉錄物組學英文名稱transcriptomics定 義研究基因組轉錄產生的全部轉錄物的種類、結構和功能的學科。應用學科遺傳學(一級學科),總論(二級學科)
轉錄激活因子的定義
定義1:一個轉錄因子家族,通過識別和結合環腺苷酸應答元件而激活基因表達。環腺苷酸應答元件存在于很多病毒和細胞的基因啟動子中。 所屬學科:生物化學與分子生物學(一級學科);基因表達與調控(二級學科)定義2:與特定DNA序列結合以促進基因轉錄的因子。 所屬學科:遺傳學(一級學科);分子遺傳學(二級學科)
轉錄物組學的定義
中文名稱轉錄物組學英文名稱transcriptomics定 義研究基因組轉錄產生的全部轉錄物的種類、結構和功能的學科。應用學科遺傳學(一級學科),總論(二級學科)
轉錄起始因子的定義
中文名稱轉錄起始因子英文名稱transcription initiation factor定 ?義參與轉錄起始作用的因子。應用學科遺傳學(一級學科),分子遺傳學(二級學科)
共轉錄物的定義
中文名稱共轉錄物英文名稱cotranscript定 義多順反子或操縱子中各個基因共同轉錄所產生的轉錄物,編碼并合成出多個蛋白質產物。或通過基因操作在一個細胞或組織中同時產生的不同基因轉錄物。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),基因表達與調控(二級學科)
不對稱轉錄的定義
不對稱轉錄有兩重含義:一是指雙鏈DNA只有一股單鏈用作模板,二是指同一單鏈上可以交錯出現模板鏈和編碼鏈。不對稱轉錄RNA轉錄時,一個轉錄子內是只轉錄一條鏈的DNA上的信息,表現為不對稱轉錄。而DNA上遺傳信息以基因為單位(真核),可以在不同的單鏈上。RNA在轉錄后,加工編輯的過程中,有些情況下會把不
轉錄激活因子的定義
定義1:一個轉錄因子家族,通過識別和結合環腺苷酸應答元件而激活基因表達。環腺苷酸應答元件存在于很多病毒和細胞的基因啟動子中。 所屬學科:生物化學與分子生物學(一級學科);基因表達與調控(二級學科)定義2:與特定DNA序列結合以促進基因轉錄的因子。 所屬學科:遺傳學(一級學科);分子遺傳學(二級學科)
基礎轉錄裝置的定義
基礎轉錄裝置(basical transcriptional apparatus):在TFⅡA~F等參與下,RNA聚合酶Ⅱ與TFⅡD、TFⅡB等聚合,形成一個功能性的前起始復合物PIC,可以開始轉錄但其速率低,因此稱為基礎轉錄裝置。
cDNA末端快速擴增技術的定義
定義:cDNA末端快速擴增技術(rapid amplification of cDNA ends, RACE)是一種基于PCR從低豐度的轉錄本中快速擴增cDNA的5'和3’末端的有效方法。
cDNA末端快速擴增技術的定義
⑴.5’ RACE-PCR:利用mRNA的3‘末端的poly(A)尾巴作為一個引物結合位點,以連有SMART寡核營酸序列通 用接頭引物的Oligo(dT)30MN作為鎖定引物反轉錄合成標準第一鏈cDNA。然后用一個基因特異引物GSP2 (gene specific primer,GSP)作為上游引物
擴增曲線定義是什么?
擴增曲線(擴增曲線):在實時熒光定量PCR反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增大。
逆轉錄PCR,擴增出的條帶怎樣區分
區分你的模板里面是否有基因組污染的方法:在做逆轉錄反應的同時,做一個陰性對照,其他所有都和實驗組相同,除了不加入逆轉錄酶。得到RT-PCR產物后跑膠,如果該陰性對照里也擴增出來明顯條帶的話,你的模板就是有基因組污染,否則就是正常。
核酸序列擴增法的定義和原理
中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點,將結合位點序列與靶序列相連,然后產生靶分子的RNA拷貝,形成反轉錄和RN
mRNA差別顯示反轉錄PCR的定義
中文名稱mRNA差別顯示反轉錄PCR英文名稱differential mRNA display reverse transcription PCR;DDRT-PCR定 義用反轉錄PCR方法顯示出在不同發育階段或不同生理狀態下的或不同類型的組織、細胞中的mRNA,以研究基因的時間-空間表達模型。應用
折射系統的定義
中文名稱 折射系統英文名稱 dioptricsystem中文名稱:折射系統;英文名稱:dioptricsystem;定義:利用光的折射作用的光學系統。應用學科:機械工程(一級學科);光學儀器(二級學科)...
折射系統的定義
中文名稱 折射系統英文名稱 dioptricsystem中文名稱:折射系統;英文名稱:dioptricsystem;定義1:利用光的折射作用的光學系統。;應用學科:機械工程(一級學科);光學儀器(二級學科)
修飾系統的定義
中文名稱修飾系統英文名稱modification system定 義參與修飾作用的組成與機制。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),總論(二級學科)
應用mRNA反轉錄擴增cDNA(RTPCR)
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 酶促催化使RNA反 轉 錄 為cDNA第一鏈。 一 條寡聚脫氧核苷酸引物先 與 mRNA雜交,然 后 由RNA依賴的DNA聚合酶催化合成相應互補的cDNA拷貝,后者能進一步 用 于PCR擴增。依據實驗的不同目的,針對單鏈cD
低豐度核酸反轉錄及擴增實驗
實驗材料 核酸試劑、試劑盒 dNTPMnCl2MgCl2BSArTth DNA聚合酶儀器、耗材 水浴鍋培養箱實驗步驟 1. ?用過氧化物酶,蛋白酶K和DNA酶預處理載玻片。2. ?配置如下一步反應體系(總體積100 μl)(1)0.5 μl 100 μmol/l 正向引物(終濃度0.5 μmol/l
應用mRNA反轉錄擴增cDNA(RTPCR)
實驗方法原理 反轉錄 PCR ( reversetranscriptase'PCR,RT-PCR ) 是一種從 RNA 擴增 cDNA 拷貝的方法。RT-PCR 對于獲得與克隆 mRNA 的5'、3' 末端序列和從非常少量的 mRNA 樣品構建大容量的 cDNA 文庫
應用mRNA反轉錄擴增cDNA(RTPCR)
RT-PCR技術可應用于:(1)構建大容量cDNA文庫;(2)鑒 定已轉錄序列是否發生突變及呈現多態性;(3)測定基因表達的強度。實驗方法原理酶促催化使RNA反 轉 錄 為cDNA第一鏈。 一 條寡聚脫氧核苷酸引物先 與 mRNA雜交,然 后 由RNA依賴的DNA聚合酶催化合成相應互補的cDNA拷貝
基因擴增PCR的擴增與克隆方法介紹
①引物的序列應位于基因組DNA的高度保守區,且與非擴增區無同源序列。這樣可以減少引物與基因組的非特異性結合,提高反應的特異性 ②引物長度:15-40bp為宜。引物過短或過長均可使反應的特異性下降。 ③引物的堿基盡可能隨機發布,避免出現數個嘌呤或嘧啶的連續排列,G+C堿基的含量在40%-75%
研究揭示古菌因子依賴型轉錄終止分子機制
9月25日,中國科學院上海免疫與感染研究所王程遠研究組聯合美國羅格斯大學Richard Ebright團隊、美國科羅拉多州立大學Thomas Santangelo團隊,在《自然》(Nature)上發表了題為Structural basis of archaeal FttA-dependent tra
研究揭示古菌因子依賴型轉錄終止分子機制
9月25日,中國科學院上海免疫與感染研究所王程遠研究組聯合美國羅格斯大學Richard Ebright團隊、美國科羅拉多州立大學Thomas Santangelo團隊,在《自然》(Nature)上發表了題為Structural basis of archaeal FttA-dependent tra
DNA擴增的反應方法
在研究或診斷中,DNA擴增可以通過以下方法進行:聚合酶鏈反應(PCR):一種簡單、廉價、可靠的通過聚合核苷酸,重復復制靶標DNA片段的方法?[2]??。連接酶鏈反應(LCR):一種擴增核酸獲得探針的基因擴增方法。對于兩條DNA鏈中的每一條,連接酶連接兩個部分探針成實際的一條。因此,LCR使用兩種酶:
EMA擴增檢測系統優勢
EMA擴增檢測系統優勢: 快速:從取樣到出結果僅需35分鐘; 簡便:操作簡便,試劑常溫保存,常溫運輸,常溫檢測,結果可視化; 檢測對象廣泛:可同時檢測DNA和RNA; 多指標:針對單一樣本,可以同時檢測多種不同的病原體; 耐受性強:對PCR擴增的抑制劑耐受性較強,比