鄰甲苯胺測定血清中葡萄糖實驗

一、實驗試劑：

l. 鄰甲苯胺試劑：940ml冰醋酸中加入硫脲1.5g鄰甲苯胺60ml混合．直至硫脲完全溶解，置棕色瓶中．

2. 12mmol/L苯甲酸溶液：于900ml蒸餾水中加入苯甲酸（MW＝122.12）1.46g，加熱助溶，冷卻后置于1L容量瓶中，加蒸餾水至刻度．

3、葡萄糖標準貯存液（100mmol/L）：稱取無水葡萄糖（MW＝180.16）預先置80℃烤箱干燥至恒定，移置干燥器內保存）1.802g，溶解于80ml苯甲酸溶液中移置 100ml容量瓶中，再加苯甲酸溶液至刻度．

4、葡萄糖標準應用液（5mmol/L）：葡萄糖標準貯存液50ml，置于100ml容量瓶中加苯甲酸溶液至刻度．

二、實驗操作；

取數支 16mm×150mm試管，按下表進行操作：

混勻后，置沸水浴中加熱12min，取出置冷水中冷卻5min；分光光度計630nm，比色杯光徑1.0cm空白管調零，讀取標準管與測定管吸光度。

五、計算：

體液葡萄糖 mmol／L＝測定管吸光度/標準管吸光度×5

參考值：血清葡萄糖為 3.89－6.11mmol／L［70－110mg/dL］

1、本法不需除蛋白，鄰甲苯胺試劑只與醛糖顯色，血液中其它還原物質基本無影響。

2、葡萄糖與鄰甲苯胺試劑顯色的深淺及穩定性與試劑中鄰甲苯胺濃度冰醋酸及加熱時間有關．因此，測定管、標準管、空白管的加熱時間及溫度必須一致，每批測定數不宜過多，水浴中水量要大，水面應超過試管中試劑液面以便能較好的控制反應條件。

3、最終反應液偶爾會產生混濁，最常見的原因是高脂血癥；此時可向3ml顯色液中加入異丙醇，充分混勻溶解脂質，可清除濁度，所測得吸光度乘以1.5．