“鳥槍法”是一種由生物基因組提取目的基因的方法。首先利用物理方法(如剪切力、超聲波等)或酶化學方法(如限制性內切核酸酶)將生物細胞染色體DNA切割成為基因水平的許多片段,繼而將這些片段與適當的載體結合,將重組DNA轉入受體菌擴增,獲得無性繁殖的基因文庫,再結合篩選方法,從眾多的轉化子菌株中選出含有某一基因的菌株,從中將重組的DNA分離、回收。
這種方法也就是應用基因工程技術分離目的基因,其特點是繞過直接分離基因的難關,在基因組DNA文庫中篩選出目的基因。可以說這是利用“溜散彈射擊”原理去“命中”某個基因。由于目的基因在整個基因組中太少太小,在相當程度上還得靠“碰運氣”,所以人們稱這個方法為“鳥槍法”或“散彈槍”實驗法。
1999年,Yates研究組提出“鳥槍法”(shotgun),其基本技術路線是針對液體或SDS-PAGE條帶的復雜混合物用酶(Trypsin)酶解成肽段混合物,然后對肽混合物進行多維毛細管液相色譜分離......
【摘要】鳥槍法串聯質譜蛋白質鑒定策略由于其高可靠和高效率而被廣泛應用于蛋白質組學研究中,這種方法直接對蛋白質混合物進行酶切,以肽段為鑒定單元,繼而推導真實的樣品蛋白質。由于利用質譜圖推導肽段存在一定的......
摘要蛋白質定量是探索疾病發生發展狀況和尋找新藥靶標的重要手段。在shotgun蛋白組學中,目前常用定量方法包括綜合同位素標記后的質譜峰強度方法和無標記定量方法。根據數據類型無標記定量方法可以分為兩類:......
摘要細胞質膜是細胞中重要的細胞器,在肝功能的發揮中具有非常重要的作用.使用蔗糖密度梯度離心純化細胞質膜,通過電子顯微鏡觀察和免疫印跡法檢驗膜的純度.結果顯示,與組織勻漿成分相比,質膜富集了20倍,線粒......