westernblot中封閉主要是起去除非特異性吸附的作用在westernblot轉膜時，PVDF膜在甲醇活化后是帶電的，因而在轉膜時會將蛋白吸附。封閉的目的就是要將PVDF膜上無蛋白的部分空隙用奶粉填滿，以免孵抗體的時候一抗二抗與之結合，產生非特異條帶或者是背景雜亂。所以westernblot中封閉主要是起去除非特異性吸附的作用
VDF膜一定要在純甲醇里浸潤的！不然蛋白結合不上去。在100%甲醇里短暫浸潤,其目的是為了活化PVDF膜上面的正電基團，使它更容易跟帶負電的蛋白質結合。小分子及大分子量的蛋白轉移時，多加或不加甲醇也是......
