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  • 發布時間:2023-03-23 14:47 原文鏈接: cck8實驗步驟及注意事項

    cck8實驗步驟:

    1、細胞種板:將對數生長期細胞用胰蛋白酶消化,配制成細胞懸液,每孔加入100 μl,使每孔細胞密度1000-5000個,邊緣孔用無菌PBS填充。5%CO2,37℃培養至細胞貼壁鋪滿孔底。

    2、按實驗方案加入藥物。每種處理建議設置4-6個復孔。

    3、處理結束后,每個孔中分別加入10 μl CCK-8溶液,輕輕敲擊培養板混勻,培養箱中孵育1-4小時。

    4、使用酶標儀測定450nm光吸收值,按公式計算藥物對細胞的抑制率。



    注意事項

    1、如果暫時不測定OD值,可向每孔中加入10μl0.1M的HCl溶液或者1%SDS(w/v)溶液,室溫避光保存,在24h內測定,吸光值不會發生變化。

    2、如果待測物質有氧化性或者還原性,可在加CCK-8之前除去舊培養液,并用培養基洗滌兩次,然后加入新鮮培養基,以去除影響。


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