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  • 發布時間:2022-04-11 14:48 原文鏈接: hepg2細胞siRNA轉染條件

    之前我們用過Lipo,說明書上要求細胞的密度在70%左右,同時在轉染后的4-6小時注意要換培養液,后來我們實驗室換了RFect sRNA Transfection Reagent,細胞密度在45%左右 ,設置siRNA終濃度10nM,30nM,50nM,100nM四個梯度,每個梯度最好做2個復孔,一般做轉染前一天鋪板,用來稀釋siRNA和稀釋轉染試劑的培養基必須是無血清培養基,因為血清的存在會干擾siRNA與轉染試劑的混合,并且影響轉染效率。轉染后48h收細胞做qPCR基因水平檢測或者轉染后72h收細胞提蛋白做western Blotting蛋白水平檢測。

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