一、生物素標記的Oligo（dT）探針與mRNA的煺火
1. 在DEPC處理過的1.5 ml Eppendof管中，加入0.2-1 mg 的總RNA和無RNase的水至終體積為0.5 ml。
2. 65℃加熱10 min。
3. 加入2 μl 生物素標記的Oligo（dT）探針和12 μl 的20×SSC于RNA中輕輕混勻，室溫放置，逐漸冷卻平衡至室溫，此步操作一般需10 min。
二、親和素順磁磁珠（SA-PMPS）的沖洗
1. 將SA-PMPS輕晃開后，放入磁性分離架中，使SA-PMPS集中于試管一則（約30秒）， 小心去除上清（不用離心方法）用1.5 ml 0.5×SSC漂洗SA-PMPS，用磁性分離架集中磁珠， 去除上清，漂洗3次。
2. 將漂洗過的SA-PMPS重新懸浮于0.2 ml 0.5×SSC中。 雜交體的生成及漂洗。
3. 將上步“3”中褪火的生物素標記的Oligo（dT）探針，全部加到上步“5”管中，輕輕混勻，室溫放置10 min。每隔2分鐘輕輕混勻一次。
4. 用磁性分離架捕獲磁珠，吸棄上清。
5. 用0.3 ml 0.1×SSC漂洗SA-PMPS，用磁性分離架集中磁珠，吸棄上清，漂洗4次。
三、洗滌收集mRNA
1. 將漂洗過的SA-PMPS重新懸浮于0.2 ml DEPC水中。
2. 用磁性分離架捕獲磁珠，將洗脫的水相吸至一新管中。重復洗滌一次，吸取水相，兩次水相合并（約0.25 ml）
3. 在洗脫液中加入0.1體積的NaAC，1體積的異丙醇，-20℃沉淀過夜，12 000 g 離心10 min，75%乙醇洗沉淀，真空干燥。
4. 提取mRNA質量的分光光度計檢測，將所提mRAN分別在260，280 nm 比色，要求A. OD260%/ OD280%不小于2.0及40 μg 所提樣品在OD260%的值為1 。
5. 提取mRNA質量的電泳檢測，在1%的變性膠上，EB染色后，mRNA應在0.5-8 Kb 間均勻著色，1.5-2 Kb 間著色較強。
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