（1）切割基因時選用不同限制酶，形成的黏性末端不同，這樣可以防止基因自身環化和不正確的連接．切割完成后，需用DNA連接酶將兩基因連接成GFP-N融合基因（以下稱融合基因），由于GFP基因切割是左端，而N基因切割是右端，因此該融合基因的上游基因為N基因．
（2）由于融合基因的兩端限制酶切割位點分別為KanⅠ、XbaⅠ，因此若用質粒做運載體，需用這兩種酶切割質粒．在構建的融合基因表達載體中，調控融合基因轉錄的結構為啟動子和終止子．
（3）融合基因的化學本質為DNA，DNA屬于大分子，因此進入細胞的方式為胞吞．用激光激發ES細胞并用熒光顯微鏡觀察，可確定細胞內有綠色熒光現象的ES細胞轉染了融合基因．
（4）ES細胞在功能上具有發育的全能性，當培養在飼養層細胞上時，細胞只分裂不分化．將整合了融合基因的ES細胞，在培養液中培養并加入相應的分化誘導因子后，ES細胞進行分裂、分化，最終形成正常的腎小球足突細胞，可用于該腎病的治療．
故答案為：
（1）防止基因自身環化和不正確的連接 N基因
（2）KanⅠ、XbaⅠ啟動子和終止子
（3）胞吞 綠色熒光
（4）發育的全能性 飼養層細胞 分裂、分化