westernblot激光近紅外熒光檢測的特點

Western blot方法是生物實驗室常用的蛋白檢測方法之一，自從1979提出至今已有數十年的歷史。常用的檢測方法有化學發光法和熒光方法。NIR近紅外熒光檢測方法，印跡膜自發熒光較低，信噪比高。NIR熒光檢測能獲得高信噪比和高質量圖片主要依賴于激發強度大，精密的激光光源和專業的光學元件。我們Azure C500和600成像系統帶有雙激光光源，我們來看下激光光源能給我們帶來哪些好處。

1. 激光光源更容易達到染料的吸收峰

2.窄光譜激光減少光泄漏的產生

3.激光檢測在更短時間內實現更高信噪比

4.激光檢測具有較低的背景

如果您有帶有激光激發的近紅外熒光成像系統，那么您還可以進行很多其他實驗哦，如下但不限于：

? 雙色印跡膜成像：用于精準定量，滿足期刊雜志需求

? in-cell western檢測實驗：傳統的western blot對于一些大分子量的蛋白檢測具有局限性，近紅外染料的問世，可以在細胞培養板上進行in-cell western檢測，省去了電泳，轉膜等等繁瑣的步驟，根據孵育二抗所發出熒光信號進行檢測；還可以用于藥物篩選，FDA已經規定胰島素和一些抗腫瘤藥物的體外效價評價標準使用此方法

? EMSA（凝膠遷移或電泳遷移率檢測）實驗：紅外熒光技術可以解決EMSA實驗中探針示蹤問題，還可以進行雙色標記檢測競爭性結合；

? 活體成像：近紅外熒光染料具有良好的組織滲透性、無毒性和無放射性等特點，可以真正無損傷的研究活體動物體內腫瘤的生長及轉移，感染性疾病發生發展過程或者監控活體生物體內的細胞活動和基因表達，有效的研究觀測轉基因生理過程等。在這點上別拿我們家寶寶與輕（zhuan）奢（yong）品（jiqi）比，你懂的。

? 組織切片成像：使用IRDye?抗體或熒光探針，根據標準的免疫組織化學實驗協議進行標記，可以在宏觀層面上進行實驗分析，組織切片紅外成像優勢在于可以在使用顯微鏡之前宏觀快速瀏覽感興趣的部分；可進行兩通道標記，進行多重標記檢測；可對染色部位進行定量分析等。

? 微印跡分析(micro-western arrays):能夠將western blot的特異識別能力和DNA芯片檢測的高通量能力結合起來，幫助實驗者一次實驗可觀測到細胞中各種蛋白之間的網絡系統，節省每次反復實驗的人力和物力。這種方法是利用預制的micro-western膠（包含96個微膠）來預印細胞裂解物，進行半干式轉印，將樣品轉移到NC膜上或PVDF膜上，進行封閉，近紅外二抗孵育，使用近紅外成像系統進行成像，這種新技術，可用極少樣品和抗體分析大量數目不同蛋白的變化，極適合研究干細胞、癌細胞、組織發育等過程中的信號傳導路徑的變化。