先說這個實驗總體的背景，有黑點，這種背景非常像封閉液沒有完全溶解帶有雜質，或者是容器沒洗干凈，有臟東西了，最好把封閉液用0.22um的膜過濾一下再做。然后其他器皿都洗刷干凈。洗液里面加點tween試試。再一個看條帶，感覺特異性不太好，條帶太多了。看過抗體廠家提供的圖也是這樣的嗎？可以先試試把抗體濃度降低，孵育時間縮短，減少非特異結合。但是從你的情況看，估計很容易導致特異蛋白沒信號，不過還是值得一試的。內參看的話，抗體特異性好很多呢。所以可能抗體的問題會比較大。這個抗體別人用怎么樣啊？
