丙肝病毒的微生物學診斷

　　RIA或者ELISA

　　即：放射免疫診斷（RIA）或酶聯免疫試驗（ELISA）檢測血清中抗HCV

　　1989年，Kuo等建立了抗-C-100放射免疫試驗方法（RIA），隨后 Ortho公司又研制成功酶聯免疫試驗方法（ELISA）檢測抗-C-100。這兩種方法均用重組酵母表達的病毒抗原（C-100-3，為NS4編碼的蛋白，含363個氨基酸），經純化后包被微量塑料板孔，然后加被檢血清，該病毒抗原即與被檢血清中抗-C-100結合，最后加同位素或酶標記的鼠抗人lgG單克隆抗體，加底物顯色判斷結果。

　　用上述酶聯免疫試驗法（ELISA）檢測抗-C-100有如下缺點：

　　1. 抗-C-100出現較晚，約半數輸血后丙型肝炎病人于輸血后4～6個月抗-C-100首次陽轉，因此，不宜作為急性丙型肝炎的常規實驗室診斷；

　　2.抗-C-100不是中和抗體，也不是lgM抗體，而是lgG 抗體；

　　3.本法不夠靈敏，少數丙型肝炎病人檢測不到抗-C-100；

　　4.有非特異性，一些自家免疫性慢性肝病患者可出現假陽性，因此，抗HCV陽性需作重組免疫印跡試驗(Recombinant Immune Blot Assay, RIBA, 或稱 Western Blot)證實。

　　由于HCV核心抗體出現較早，因此，最近美國第二代酶聯免疫試驗法（ELISA）檢測抗HCV。該試劑盒采用HCVC區編碼蛋白C-22-3和非結構區NS3編碼蛋白C-33-3和C-100-3包被載體。用本法檢測抗HCV，其檢出率可提高25～30%，且檢出抗HDV的時間也可提早16～42天。

　　HDV cDNA/聚合酶鏈反應

　　(HCV cDNA/Polymerase Chain Reaction,RTPCR)測定肝和血清中HCV RNA。

　　本法是將HDV RNA逆轉錄為HCV DNA，選用高度保守的5′非編碼區引物擴增放大后作電泳觀察結果。本法較靈敏。由于肝和血清中HCV RNA出現較抗-HCV為早，一些HCV感染者抗HCV尚未陽轉時，其肝和血清中已可測到HDV RNA。HCV RNA陽性，說明病毒在體內復制；HCV RNA陰轉，說明病毒被清除。因此，RT-PCR可作為丙型肝炎的早期診斷和獻血員篩查的出現指標，也可作為丙型肝炎預后的一個指標。