中國科技大學Hepatology肝病研究新成果

　　來自中國科技大學生命科學學院的研究人員在小鼠中證實，同時抑制NKG2D受體的多個配體可以阻止自然殺傷細胞介導的急性重型肝炎。相關論文發表在2013年國際著名肝臟疾病雜志Hepatology紙質版(最新影響因子11.665)上。

　　中國科技大學的田志剛(Zhigang Tian)教授和孫汭( Rui Sun)教授為這篇論文的共同通訊作者。這一研究獲得了國家重點基礎研究發展計劃項目(973計劃)、國家自然科學基金和國家科技重大專項的資金資助。

　　NK細胞，作為重要的先天免疫系統，在對抗病毒感染和腫瘤生長的先天性免疫反應中發揮著關鍵性的作用。不同于T細胞和B細胞，NK細胞缺乏識別外來抗原的可變受體，但它們具有保守的抑制性受體和激活性受體來平衡它們的細胞毒性作用。NKG2D就是其中的一種激活性受體，可以識別各種誘導性蛋白，如人類的 MICA/B、ULBP，小鼠的Rae1 (α-?)、Mult1和H60 (a-c)。病毒感染和DNA損傷等應激刺激均可誘導這些配體。

　　NK細胞和NKG2D配體識別在炎癥中的作用已是廣為人知。過去的研究表明，采用較高的靶向特異性的抗NKG2D，能夠有效阻斷NKG2D配體互作，常用于干預NKG2D依賴性的炎癥。有研究報道抗NKG2D抗體能夠延遲NK細胞介導的氣道過敏和腸炎，減輕膠原(collage)誘導性關節炎。

　　此外，抗NKG2D抗體還可用于緩解乙型肝炎病毒感染者NKG2D介導的急性肝炎。由于治療沉默肝細胞上的NKG2D配體，相比于沉默循環免疫細胞上的NKG2D更具有特異性，且考慮到體內抗體存在的半衰期短等缺點。研究人員提出了一種通過肝特異性RNA干擾(RNAi)，抑制肝細胞上多個NKG2D配體表達的基因抑制方法。

　　在這篇文章中，研究人員構建出了一種特異性載體，可同時表達多個短發夾RNA (shRNAs)，對抗所有小鼠NKG2D配體，包括Rae1、Mult1和H60。在高壓注射包含三個shRNA序列的質粒pRNAT-shRMH后，研究人員發現肝細胞上所有三種NKG2D配體在mRNA和蛋白質水平上均表達下調。并且，NK細胞介導的NKG2D依賴的小鼠急性重型肝炎得到緩解，肝臟 NK細胞失活。pRNAT-shRMH的治療效應與注入三種抗Rae1、Mult1和H60單克隆抗體的效應相當。

　　為了獲得更好的體內應用，研究人員又構建了一種包含pRNAT-shRMH的重組腺病毒，將之命名為Ad-RMH，其能夠有效地感染肝臟。研究人員觀察到Ad-RMH靜脈注射與pRNAT-shRMH高壓注射具有相似的治療效應。值得注意的是，同時抑制多個人類NKG2D配體MICA/B、 ULBP2和ULBP3，也能顯著減弱NK細胞對人類NKG2D配體陽性肝細胞L-02的攻擊，表明有可能將之轉化到人體環境中。

　　這些結果表明同時抑制多個NKG2D配體可以阻止NK細胞介導的急性重型肝炎，是一種有潛力的肝病治療方法。