為什么出現多條帶,每個加樣槽中都出現了多條帶,而且好像都很有規律,為什么?是封閉時間不夠嗎?做Western必須要內參嗎?
一抗、或二抗抗體濃度太高,多克隆抗體本身的非特異性反應,抗體的特異性不強,目的蛋白經過處理后發生變化,而內參的條帶基本均勻一致,這樣才有說服力。表明的確是處理因素造成目的蛋白的變化而不是加樣誤差或人為造成目的條帶濃度的變化,嚴格意義上講,內參是必須的。