人單核／巨噬細胞的表型檢測

基本方案

材料

待 測 單 個 核 細 胞（肝素抗凝血或肝素抗凝骨髓）或 外 周 血 單 個 核 細 胞（單 元 8.1)或者單核/巨 噬 細 胞（單 元 8. 5 , 推薦采用陰性分選）

PBS

PBS/肝素：含 0.1% (V/V ) 肝 素 的 PBS

阻 斷 IgG，濃 度 3 mg/ml (如正常小鼠 IgG， Caltag)

熒光素標記的單克隆抗體（表 6. 3. 2)

E M A (Ethidium monoazide) 溶液

A C K 裂 解 液（新鮮配制，室溫保存應< 1 2 h)

7 2 % (m /V ) 甲醛

12m m X 75m m 試管

15m l 錐 底 塑 料 離 心 管（Falcon)

低 功 率 白 熾 燈（如 40W 白熾燈）

Sorvall R T 6000B 離心機和轉子

la. 使用肝素抗凝血或抗凝骨髓時：在 15m l 錐底塑料離心管中加入約 IOml 抗凝血或1?3ml抗凝骨髓， 4℃， 1500g離心 3min。棄血 漿 ，加入 1 〇ml PBS/肝素，蓋緊。