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  • 發布時間:2019-04-03 22:34 原文鏈接: 人臍動脈平滑肌細胞培養實驗——貼塊法

    實驗方法原理運用貼塊法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
    實驗材料

    臍帶

    試劑、試劑盒

    膠原酶消化液胰蛋白酶膠原酶彈性蛋白酶DMEM

    儀器、耗材

    眼科剪滴管離心機培養皿CO2培養箱

    實驗步驟

    一、實驗步驟


    1.  要用胎牛血清。開始用的是小牛血清,所以總是不成功,培養基換為 DMEM/F12,但后來我又換成 DMEM,也培養出來了。


    2.  把臍動脈剪開很麻煩,因為它老是打彎,可以找個軟木塞,用大頭針固定,可用塊木板,因為有磨擦力,所以動脈可以固定在板上。


    3.  對于新手來講,最麻煩的就是把組織快剪成1 mm大小小塊,可以找塊磨砂玻璃,切完再剪就 好多了。


    4.  把剪碎的組織快移到培養瓶里,可采用類似牙科的刮匙,直接放進瓶里。加入2  mL 培養液, 一定不能放多,防止漂浮。然后用玻璃分針輕輕將小塊分離開。


    5.  其它的基本就按文獻就可以了,如三個小時后翻瓶、換液時保留1/3。

     


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