人臍動脈平滑肌細胞培養實驗——貼塊法
實驗方法原理運用貼塊法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原酶消化液胰蛋白酶膠原酶彈性蛋白酶DMEM儀器、耗材眼科剪滴管離心機培養皿CO2培養箱實驗步驟一、實驗步驟1. 要用胎牛血清。開始用的是小牛血清,所以總是不成功,培養基換為 DMEM/F12,但后來我又換成 DMEM,也培養出來了。2. 把臍動脈剪開很麻煩,因為它老是打彎,可以找個軟木塞,用大頭針固定,可用塊木板,因為有磨擦力,所以動脈可以固定在板上。3. 對于新手來講,最麻煩的就是把組織快剪成1 mm3 大小小塊,可以找塊磨砂玻璃,切完再剪就 好多了。4. 把剪碎的組織快移到培養瓶里,可采用類似牙科的刮匙,直接放進瓶里。加入2 mL 培養液, 一定不能放多,防止漂浮。然后用玻璃分針輕輕將小塊分離開。5. 其......閱讀全文
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗——貼塊法
實驗方法原理運用貼塊法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原酶消化液胰蛋白酶膠原酶彈性蛋白酶DMEM儀器、耗材眼科剪滴管離心機培養皿CO2培養箱實驗步驟一、實驗步驟1. ?要用胎牛血清。開始用的是小牛血清,所以總是不
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗——消化法
人臍動脈平滑肌細胞培養可以:(1)獲得人臍動脈平滑肌細胞;(2)作為重大動脈疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)對血管疾病的藥理學和治療繼續提供信息。實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原
大鼠主動脈平滑肌細胞培養實驗_貼塊法
大鼠主動脈平滑肌細胞培養可用于:(1)獲得大鼠主動脈平滑肌細胞;(2)用于血管疾病研究;(3)用于動脈疾病研究。 實驗方法原理 運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養,并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。 實驗材料 SD
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
消化法 貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
消化法 貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
細胞技術專題:人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
人臍動脈平滑肌細胞培養可以:(1)獲得人臍動脈平滑肌細胞;(2)作為重大動脈疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)對血管疾病的藥理學和治療繼續提供信息。實驗方法消化法 貼塊法 實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養,并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。 實
大鼠主動脈內皮細胞培養實驗——貼塊法
大鼠血管內皮細胞培養可用于:(1)血液流動性、防止血栓形成、調節血管張力等研究;(2)選擇性通透性以及免疫調節等方面研究。實驗方法原理貼塊法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養,其方法較酶消化法簡便、經濟。實驗材料雄性Wistar大鼠試劑、試劑盒DMEM胎牛血清內皮細胞生長因子肝素鈉青
家兔椎間盤細胞培養實驗——貼塊法
家兔椎間盤細胞培養可以:(1)獲得家兔椎間盤細胞;(2)用于椎間盤相關課題研究;(3)用于家兔模型研究。實驗方法原理首先建立家兔椎間盤細胞的體外培養系統,其中,第一組給予純氧,另外3組給予不同濃度的臭氧:30 ug/ml,60 ug/ml和80 ug/ml,然后于15 min及30 min后,采用臺
平滑肌細胞培養方法3
2 結果2.1 體外培養的胎兒臍動脈血管平滑肌細胞的形態觀察 實驗中觀察到臍動脈組織塊貼壁后5~7d可見有細胞以垂直方向從組織塊周圍游走出來(見圖1),但并不是所有的組織塊周圍都有細胞游出,離組織塊較遠的區域也可以看到細胞,此為平滑肌細胞的漂移性生長特性(見圖2),細胞形態多樣,大小不一,多為長梭形
大鼠主動脈平滑肌細胞培養實驗
貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養,并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。
初代細胞培養實驗——組織塊培養法
實驗材料組織試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶NaHCO3儀器、耗材吸管培養瓶燒杯眼科剪眼科鑷實驗步驟1. ?剪切把組織小塊(1cm3)置入小燒杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污,吸凈Hanks液,用眼科剪反復剪切成1mm3塊為止;2. ?擺布用彎頭吸管吸取若干小塊,置入培養
臍帶和臍血來源干細胞培養實驗_種植法
種植法從Wharton膠中分離干細胞實驗材料臍帶試劑、試劑盒Wharton膠儀器、耗材6孔板實驗步驟(a)正常分娩后獲得臍帶,保存在PBSA中,1?24 h內處理標本。(b)去除血管,將Wharton膠切成小塊。(c)將種植塊轉移到加有DMEM/FBS的6孔板中。(d)將培養板靜置5?7天,使細胞從
大鼠主動脈平滑肌細胞培養
實驗方法原理 運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養,并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料 SD大鼠試劑、試劑盒 PBSFBSDMEM儀器、耗材 手術剪手術鉗眼科剪刀眼科鑷子大頭針手術刀培養皿實驗步驟 一、實驗步驟1. SD 大鼠(150
HUVEC人臍靜脈內皮細胞培養要點
1984年,HUVEC細胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan從一段長約10-20cm的人正常臍帶靜脈中獲取、建立。SetsukoShioda等人研究發現,HUVEC細胞株18-30代的倍增時間為23.5個小時,24-27代的倍增時間為67個小時,27-30代的倍
HUVEC人臍靜脈內皮細胞培養要點
1984年,HUVEC細胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan從一段長約10-20cm的人正常臍帶靜脈中獲取、建立。SetsukoShioda等人研究發現,HUVEC細胞株18-30代的倍增時間為23.5個小時,24-27代的倍增時間為67個小時,27-30代的倍
HUVEC人臍靜脈內皮細胞培養要點
1984年,HUVEC細胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan從一段長約10-20cm的人正常臍帶靜脈中獲取、建立。SetsukoShioda等人研究發現,HUVEC細胞株18-30代的倍增時間為23.5個小時,24-27代的倍增時間為67個小時,27-30代的倍
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗——酶分離法
兔膀胱平滑肌細胞培養可以:(1)分離得到高純度兔膀胱平滑肌細胞;(2)進行細胞學鑒定研究;(3)用于細胞學其他研究。實驗方法原理運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長
平滑肌細胞培養方法2
1 材料與方法1.1 材料 9~12d新生健康清潔級KM小鼠,雌雄不限,購自重慶醫科大學實驗動物中心。RPMI-1640干粉培養基,D-Hanks粉,標準胎牛血清,胰蛋白酶粉(1∶250)均購自Hy-Clone公司;青霉素鈉、硫酸鏈霉素購自華北制藥廠;鼠抗兔平滑肌α肌動蛋白單克隆抗體,購自Zymed
如何巧妙利用血清培養細胞
在細胞培養實驗室中,血清是常見的科研試劑之一,常見的血清種屬有人的和動物兩種,而動物的又分為牛、豬、雞、羊等,根據客戶對產品種屬與來源的選擇,價格也是不同的。對于實驗新手來說,稍有不慎就會影響到實驗結果,甚至讓花費幾千元買來的血清失去效果。那么我們要如何正確的使用與操作呢?今天上海文韌與您探討“如何
大鼠主動脈內皮細胞培養實驗
大鼠血管內皮細胞培養可以:(1)用于血液流動性、防止血栓形成、調節血管張力等研究;(2)用于選擇性通透性以及免疫調節等方面研究。實驗方法貼塊法實驗方法原理貼塊法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養,其方法較酶消化法簡便、經濟。但缺點使易混有成纖維細胞和平滑肌細胞,前者的貼壁時間和內皮接
人臍血間充質干細胞培養流程
1. 準備:MSC 細胞培養基配制:MSC 基礎培養基 440 ml+FDCC 胎牛血清 50 ml+青霉素 5 ml+谷氨酸鹽 5 ml(一般分裝成 10 管 50 ml,后考慮 1 株僅傳 3~5 代約需多 5 管)。并于培養室內提前準備 T25 培養瓶、15 ml 離心管、50 ml 離心管、
人臍血間充質干細胞培養流程
準備:MSC 細胞培養基配制:MSC 專用基礎培養基 440 ml+FDCC 胎牛血清 50 ml+青霉素 5 ml+谷氨酸鹽 5 ml(一般分裝成 10 管 50 ml,后考慮 1 株僅傳 3~5 代約需最多 5 管)。并于培養室內提前準備 T25 培養瓶、15 ml 離心管、50 ml 離心管、
SH30370.03胎牛血清培養血管平滑肌細胞常用的方法
Hyclone標準胎牛血清FBS SH30370.03胎牛血清培養血管平滑肌細胞常用的方法有貼塊法(explant)和酶解離法(enzyme disperse)。下面一起來看下這兩種方法。1、貼塊法方法:動物經頸動脈放血后,在無菌操作下迅速取出胸腹主動脈段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3
胎牛血清培養血管平滑肌細胞常用的方法
胎牛血清培養血管平滑肌細胞常用的方法有貼塊法(explant)和酶解離法(enzyme disperse)。下面一起來看下這兩種方法。1、貼塊法方法:動物經頸動脈放血后,在無菌操作下迅速取出胸腹主動脈段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3次,將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層,然后縱行切開血
正常大兔主動脈平滑肌細胞培養
實驗材料:1.?正常大兔主動脈2.?不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.23.?消化液:0.125%胰蛋白酶,0.1%膠原酶Ⅰ4.?細胞培養瓶(T25)5.?手術刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷6.?網篩(100目)7.?離心管(15m
正常大鼠原代主動脈平滑肌細胞培養
一、實驗試劑?1、培養基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、凍存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗滌液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗
酶分離法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離
兔膀胱平滑肌細胞培養實驗
酶分離法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后,完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞,體外原代和傳代培養分離
大鼠主動脈內皮細胞培養實驗
貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 貼塊法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養,其方法較酶消化法簡便、經濟。
大鼠主動脈內皮細胞培養實驗
貼塊法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 貼塊法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養,其方法較酶消化法簡便、經濟。